血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清.细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物.组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清.保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。自备物品酶标仪（450nm）加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL37℃恒温箱操作注意事项试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。

　　弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）!每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min.每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值！结果判断绘制标准曲线：在Excel工作表中，以标准品浓度作横坐标，对应OD值作纵坐标，绘制出标准品线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值.样品收集、处理及保存方法血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离!

　　操作步骤：1，试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温!2，实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质！3，不用的其它试剂应包装好或盖好!4，使用一次性的吸头以免交叉污染，避免使用带金属部分的加样器!5，使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。6，洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水！7，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下.

　　3mL*6管0！3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注：标准品（S0-S5）浓度依次为：0、50、100、200、400、800pg/mL试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水!

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　　从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。所有液体组分使用前充分摇匀.免责声明试剂盒仅供研究使用，不得用于临床实验或人体实验，否则所产生的一切后果，由实验者承担，本公司概不负责.