试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书稀释底A6mL3mL无底B6mL无终止液6mL3mL无终止液2张2张无说明书1张无自封袋1张无注:标准品(S0-S5)浓度依次为0，50，200，400，400，4000，8000，40000，8000试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水1:20稀释，即1份20×洗涤缓冲液和19份蒸馏水洗板子的方法1.手动洗板:甩掉孔内的液体，在每个孔中加入洗涤液，静置1分钟后甩掉孔内的液体，在吸水纸上晾干，洗板5次2.自动洗衣机:每个孔注入洗衣液350μL，浸泡1min，洗衣板5次操作步骤1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需的板条，其馀板条用自封袋密封返回4℃2.设置标准产品孔和样品孔，标准产品孔各加入不同浓度的标准产品50μL3.样品孔先加样品10μL，再加样品稀释液40μL的空白孔4.除了空白孔之外，在标准品孔和样品孔中的每个孔中添加辛辣的根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL，用密封膜密封反应孔，37℃的水浴锅和恒温箱温育60min5.放弃液体，在吸水纸上晾干，在每个孔里放入洗涤液，静置1min，扔掉洗涤液，在吸水纸上晾干，重复洗板5次(也可以用洗板机洗板)6.每个孔中加入底物a、b各50μL，37℃避光孵化15min7.每个孔中加入终止液50μL，15min以内，在450nm波长处测量每个孔的OD值结果判断绘制标准曲线:在Excel工作表中，以标准品浓度为横向坐标，对应OD值为纵向坐标，绘制标准品线性回归曲线，按曲线方程计算各种样品浓度值

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