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　　产物形成的二阶速率常数越高，在合理的时间尺度内，在接近中性的pH下，在低反应物浓度下，在不需要使用大量过量的情况下，偶联就越有效任何一种生物分子!生物正交反应物在10µM下的二阶速率常数（M–1s–1）与随时间变化的共轭产率百分比之间的关系如图2所示。反应物的另一个重要的生物偶联特征是它们具有化学选择性！也就是说，在其他生物官能团（例如氨基（-NH2）、羧基（-COOH）和/或硫醇（-SH））的丰富环境中，彼此之间具有选择性反应性!

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　　然而，SPAAC反应的反应速率本身就很低（例如0!1至0!9M–1s–1），限制了它们在相对高浓度应用中的使用（例如蛋白质-小分子偶联、细胞标记）!对于低生物分子浓度（例如5µM）的应用，逆需Diels-Alder连接对反式-环辛烯-四嗪（TCO–Tz）是一对选择!化学选择性TCO–Tz连接对具有任何其他生物正交连接对都无法比拟的超快动力学（800M–1s–1）！超快动力学、选择性和长期水稳定性的结合使TCO–Tz成为低浓度应用（如蛋白质-蛋白质偶联）的理想配对。

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