因此，只有一小部分化学转化适用于在环境温度下在pH中性的水性环境中对高度官能化的生物分子（如蛋白质、核酸和糖）进行生物正交连接，同时仍保持生物功能.适合特定应用的特定连接策略的选择基于不同的因素.铜催化的叠氮化物-炔烃环加成反应（CuAAC）的使用*限于铜毒性不重要的应用（例如肽或寡修饰，或细胞裂解物标记）。在这方面，菌株促进的炔烃-叠氮化物环加成反应（SPAAC）更适合生物偶联，因为不需要催化剂或额外的试剂.

　　然而，SPAAC反应的反应速率本身就很低（例如0！1至0!9M–1s–1），限制了它们在相对高浓度应用中的使用（例如蛋白质-小分子偶联、细胞标记）。对于低生物分子浓度（例如5µM）的应用，逆需Diels-Alder连接对反式-环辛烯-四嗪（TCO–Tz）是一对选择！化学选择性TCO–Tz连接对具有任何其他生物正交连接对都无法比拟的超快动力学（800M–1s–1）.超快动力学、选择性和长期水稳定性的结合使TCO–Tz成为低浓度应用（如蛋白质-蛋白质偶联）的理想配对!

clickchemistrytools生物素化试剂

　　生物正交激活的组分仅相互特异性和自发地反应，形成所需的缀合物!这种生物正交连接策略如图1所示为了使化学反应性官能团适合生物偶联，三个基本特征是非常重要的：反应性、化学选择性和生物相容性!第*个反应性显然是在高稀释条件下进行应用的先决条件，例如蛋白质-蛋白质偶联！由于蛋白质的可用性有限和/或相关的成本因素，蛋白质-蛋白质偶联通常被限制在低蛋白质浓度（例如1mg/mL）!反应性可以由生物正交反应物对的二阶速率常数来定义！

　　我们还提供连接产品的定制生产，以满足广泛应用中的特定物理、化学和形态规格!代谢标记试剂炔烃和叠氮化物修饰的代谢标记试剂！新生蛋白质合成糖基化脱氧核糖核酸核糖核酸翻译后修饰Click--GoIsoTAG套件用于基于点击化学鉴定复杂样品中低丰度蛋白质和肽的独立于质量的平台！对于炔烃修饰的糖蛋白对于叠氮化物修饰的糖蛋白荧光叠氮化物探针由铜催化或无金属点击化学激活的荧光叠氮化物探针!CalFluor488叠氮化物CalFluor555叠氮化物CalFluor580叠氮化物CalFluor647叠氮化物点击化学辅助试剂铜螯合配体可提高CuAAC的效率和生物相容性！

　　产物形成的二阶速率常数越高，在合理的时间尺度内，在接近中性的pH下，在低反应物浓度下，在不需要使用大量过量的情况下，偶联就越有效任何一种生物分子!生物正交反应物在10µM下的二阶速率常数（M–1s–1）与随时间变化的共轭产率百分比之间的关系如图2所示。反应物的另一个重要的生物偶联特征是它们具有化学选择性！也就是说，在其他生物官能团（例如氨基（-NH2）、羧基（-COOH）和/或硫醇（-SH））的丰富环境中，彼此之间具有选择性反应性！

　　这一重要特征经常被忽视，然而，缺乏选择性是通过不必要和非选择性的分子内相互作用进行自共轭（同源二聚体形成）的驱动力.最后，重要的是化学反应性官能团具有生物相容性。连接反应在与生物分子相容的温和水性缓冲条件下进行是至关重要的，而不需要对生物系统具有高毒性的催化试剂（例如Cu（I））.生物正交化学官能团必须在长期水储存期间保持高度反应性但稳定，同时对高浓度的其他生物官能团保持惰性！不幸的是，只有少数化学转化符合这些严格定义的条件：反应性、选择性和生物相容性。世预赛亚洲区12强赛第五轮已经结束，中国国家队在新帅里皮的率领下，在昆明拓东体育场0-0与卡塔尔队互交白卷收场。半程结束后，国足2平3负不胜在A组中垫底，与排名第三的乌兹别克斯坦队已经有了7分的差距。外媒更新了闯入俄罗斯世界杯决赛圈的概率的最新排名，根据估算中国队晋级的概率从第四轮结束时的1.44%降至最新的0.37%，换言之出局的可能性高达99.63%，而能够代表亚洲出战世界杯决赛圈的球队依然是伊朗队、韩国队、日本队和澳大利亚队。外媒计算国足出线概率降至1.44% 伊朗已超93%