细胞增殖及毒性检测CCK试剂盒——CCK8包装规格货号：K009-100、K009-500、K009-1000、K009-3000规格：100T、500T、1000T、3000T储存条件:4℃避光保存，有效期一年.产品说明CellCountingKit简称CCK试剂盒，为MTT法的替代方法，是一种基于WST（水溶性四唑盐，化学名：2-(2-甲氧基-4-硝苯（ben）基)-3-(4-硝苯（ben）基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐）的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒！

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　　在24小时内吸光度不会发生变化.Ⅲ、细胞增值-毒性检测在96孔板中配置100μL的细胞悬液。将培养板在培养箱预培养24小时（在37℃，5%CO2的条件下）。向培养板加入10μL不同浓度的待测物质。将培养板在培养箱孵育一段适当的时间（例如：124或48小时）.向每孔加入10μLCCK溶液（注意不要在孔中生成气泡，它们会影响OD值的读数）!将培养板在培养箱内孵育1-4小时!用酶标仪测定在450nm处的吸光度！

　　操作说明Ⅰ、制作标准曲线（测定细胞具体数量时）先用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量，然后接种细胞！按比例（例如：1/2比例）依次用培养基等比稀释成一个细胞浓度梯度，一般要做3-5个细胞浓度梯度，每组3-6个复孔!接种后培养2-4小时使细胞贴壁，然后加CCK试剂培养一定时间后测定OD值，制作出一条以细胞数量为横坐标（X轴），OD值为纵坐标（Y轴）的标准曲线!根据此标准曲线可以测定出未知样品的细胞数量（试用此标准曲线的前提是实验的条件要一致，便于确定细胞的接种数量以及加入CCK后的培养时间。

　　CCK用途：药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定等.注意事项：①建议先做几个孔摸索接种细胞的数量和加入CCK试剂后的培养时间!②有条件的情况下建议采用多通道移液器，可以减少平行孔减的差异！加入CCK试剂时，建议斜贴着培养板壁加，不要插到培养基页面下加，容易产生气泡，会干扰OD值读数.③白细胞可能需要培养较长时间。④当使用标准96孔板时，贴壁细胞的至小接种量至少为1,000个/孔(100μL培养基)！

浙江快速检测CCK8试剂盒说明书介绍

　　如果暂时不测定OD值，打算以后测定的话，可以向每孔中加入10μL0.1M的HCL溶液或者1%w/vSDS溶液，并遮盖培养板避光保存在室温条件下!在24小时内吸光度不会发生变化!注意：如果待测物质有氧化性或还原性的话，可在加CCK之前更换新鲜培养基（除去培养基，并用培养基洗涤细胞两次，然后加入新的培养基），去掉药物影响!当然药物影响比较小的情况下，可以不更换培养基，直接扣除培养基中加入药物后的空白吸收即可.

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