操作说明Ⅰ、制作标准曲线（测定细胞具体数量时）先用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量，然后接种细胞!按比例（例如：1/2比例）依次用培养基等比稀释成一个细胞浓度梯度，一般要做3-5个细胞浓度梯度，每组3-6个复孔。接种后培养2-4小时使细胞贴壁，然后加CCK试剂培养一定时间后测定OD值，制作出一条以细胞数量为横坐标（X轴），OD值为纵坐标（Y轴）的标准曲线.根据此标准曲线可以测定出未知样品的细胞数量（试用此标准曲线的前提是实验的条件要一致，便于确定细胞的接种数量以及加入CCK后的培养时间！

　　）Ⅱ、细胞活性检测在96孔板中接种细胞悬液（100μL/孔）。将培养板放在培养箱中预培养（在37℃,5%CO2的条件下）.向每孔加入10μL的CCK溶液（注意不要在孔中生成气泡，它们会影响OD值的读数）.将培养板在培养箱内孵育1-4小时。用酶标仪测定在450nm处的吸光度。如果暂时不测定OD值，打算以后测定的话，可以向每孔中加入10μL0！1M的HCL溶液或者1%w/vSDS溶液，并遮盖培养板避光保存在室温条件下!

　　细胞增殖及毒性检测CCK试剂盒——CCK8包装规格货号：K009-100、K009-500、K009-1000、K009-3000规格：100T、500T、1000T、3000T储存条件:4℃避光保存，有效期一年!产品说明CellCountingKit简称CCK试剂盒，为MTT法的替代方法，是一种基于WST（水溶性四唑盐，化学名：2-(2-甲氧基-4-硝苯（ben）基)-3-(4-硝苯（ben）基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐）的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒！

　　如果暂时不测定OD值，打算以后测定的话，可以向每孔中加入10μL0!1M的HCL溶液或者1%w/vSDS溶液，并遮盖培养板避光保存在室温条件下!在24小时内吸光度不会发生变化。注意：如果待测物质有氧化性或还原性的话，可在加CCK之前更换新鲜培养基（除去培养基，并用培养基洗涤细胞两次，然后加入新的培养基），去掉药物影响。当然药物影响比较小的情况下，可以不更换培养基，直接扣除培养基中加入药物后的空白吸收即可！

北京细胞增殖测定的CCK8试剂盒

　　 公司是一家以生物化工为主的企业，主打CCK8试剂盒，更多产品详详情请拨打电话：19126518388华伟 或到访深圳市宝安区新安街道宝民社区创业二路5号建设银行楼创业二路5-1。深圳市安培生物科技有限公司期待与您一起合作共赢，在追求低价格高效率，快速度的同时，更注重质量的保证，努力为客户做好每一件产品，做到在成长中求发展，始终保持一种尽善尽美的工作态度，满怀希望和热情的朝着目标努力。

　　检测白细胞时的灵敏度相对较低，因此推荐接种量不低于2,500个/孔(100μL培养基).如果要使用24孔板或6孔板实验，请先计算每孔相应的接种量，并按照每孔培养基总体积的10%加入CCK溶液.⑤如果没有450nm的滤光片，可以使用吸光度在430-490nm之间的滤光片，但是450nm滤光片的检测灵敏度至高.⑥培养基中酚红的吸光度可以在计算时，通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去，因此不会对检测造成影响！

　　在24小时内吸光度不会发生变化。Ⅲ、细胞增值-毒性检测在96孔板中配置100μL的细胞悬液!将培养板在培养箱预培养24小时（在37℃，5%CO2的条件下）!向培养板加入10μL不同浓度的待测物质。将培养板在培养箱孵育一段适当的时间（例如：124或48小时）.向每孔加入10μLCCK溶液（注意不要在孔中生成气泡，它们会影响OD值的读数）!将培养板在培养箱内孵育1-4小时。用酶标仪测定在450nm处的吸光度! 正值全市加快“森林城乡、花园南昌”建设步伐，一场春雨把南昌城沁润得清秀美丽。记者从市园林部门了解到，今年我市将在城区的几大主干道和休闲公园内实施花卉种植。截至目前，我市已引进和培育60万株品种各异的花卉，将南昌街头装扮得更加绚丽多彩。记者在南昌湿地花卉生产培养基地看到，成片的树状月季整齐地种植在花园中含苞待放。该基地一位负责人告诉记者，下个月这些月季就将正式进入花期，成片开放的月季花将汇成花的海洋。据了解，为了加快推进“森林城乡、花园南昌”建设，近期我市已经在抚河路、滨江路、阳明路等主干道种植了大量花卉，这些花卉以市花月季为主，包括大花月季、丰花月季、微型月季、树状月季、地被月季等7大系列，其中有不少月季品种都是今年新引进的。目前，有40万株已经相继种植到位。