生化试剂
公司地址:深圳市宝安区新安街道宝民社区创业二路5号建设银行楼创业二路5-1
企业信息
注册资本:50---100万
注册时间: 2018-04-25
●在极少数情况下,质粒经某些酶切后的DNA样品会出现拖尾和分辨率降低,此时建议同时尝试两种染色方法以决定哪种方法更加合适!使用方法1.胶染法(用法同EB)制胶时加入MxSafe/MxSafePlus核酸染料(例如:每50mL琼脂糖溶液中加入5μLMxSafe/MxSafePlus10,000×储液(以此比例类推)!按照常规方法进行电泳.鉴于MxSafe/MxSafePlus的高灵敏性,建议减少DNA的上样量,推荐每条泳道DNA上样量是传统上样量的1/2,例如:传统上样量是5ul/泳道,使用本成品用量就是5ul/泳道,但是不能减少核酸染料的用量(例如:每50mL琼脂糖溶液中继续加入5μLMxSafe/MxSafePlus)!
1MNaCl中,制成3×染色液!(例如将15μLMxSafe/MxSafePlus10,000×储液和5mL1MNaCl加到45mLH2O中).将凝胶小心地放入合适的容器中,如聚丙烯容器中!缓慢加入足量的3×染色液浸没凝胶。室温振荡染色30min左右,合适染色时间根据凝胶厚度以及琼脂糖浓度不同而略有不同.对于含5~10%丙烯酰胺的凝胶,染色时间通常介于30min到1h,并随丙烯酰胺含量增加而延长!注意事项:●用泡染法染色时,染料用量较多!
注意事项:●此方法染色染料用量相对较少!500μL染料大约可以做100块50mL的胶。●由于MxSafe/MxSafePlus具有良好的热稳定性,可以在热的琼脂糖溶液中直接添加,而不需要等待溶液冷却.摇晃,振荡或者翻转以保证染料充分混匀!也可以选择将MxSafe/MxSafePlus储液加到琼脂糖粉末和电泳缓冲液中,然后用微波炉或其他常用方式加热以制备琼脂糖凝胶。MxSafe/MxSafePlus兼容所有常用的电泳缓冲溶液!
北京稳定性高的核酸染料的作用_适用范围广的生物化工-深圳市安培生物科技有限公司
天津常用的核酸染料的比较
EB核酸染料:灵敏度低;稳定性高;条带不弯曲,DNA片段不迁移;安全性方面,①分子量小,易挥发升华,易吸入人体,不易生物降解,在体内长期残留。②艾姆斯氏测试结果表明,EB容易引起有机体突变,是一种强诱变剂,具有高致癌性。适用性方面,100bp以上电泳染色,背景荧光信号高;使用普通紫外凝胶透射仪观察.Goldview核酸染料:灵敏度低;稳定性高;条带不弯曲,DNA片段不迁移;安全性方面,①主要成分为吖啶橙,是一种煤焦油提取物,具有高毒,致癌,高诱变性!
●稳定性高:适用于使用微波或其它加热方法制备琼脂糖凝胶;室温下在酸或碱缓冲液中极其稳定,耐光性强!●信噪比高:样品荧光信号强,背景信号低。●操作简单:与EB一样,在预制胶和电泳过程中染料不降解;而电泳后染色过程也只需30分钟且无需脱色或冲洗,即可直接用紫外凝胶透射仪观察。●适用范围广:可选择电泳前染色(胶染法)或电泳后染色(泡染法);适用于琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶电泳;可用于dsDNA、ssDNA或RNA染色.
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