生化试剂
公司地址:深圳市宝安区新安街道宝民社区创业二路5号建设银行楼创业二路5-1
企业信息
注册资本:50---100万
注册时间: 2018-04-25
在24小时内吸光度不会发生变化.Ⅲ、细胞增值-毒性检测在96孔板中配置100μL的细胞悬液。将培养板在培养箱预培养24小时(在37℃,5%CO2的条件下)。向培养板加入10μL不同浓度的待测物质!将培养板在培养箱孵育一段适当的时间(例如:124或48小时)!向每孔加入10μLCCK溶液(注意不要在孔中生成气泡,它们会影响OD值的读数)。将培养板在培养箱内孵育1-4小时。用酶标仪测定在450nm处的吸光度!
检测白细胞时的灵敏度相对较低,因此推荐接种量不低于2,500个/孔(100μL培养基)!如果要使用24孔板或6孔板实验,请先计算每孔相应的接种量,并按照每孔培养基总体积的10%加入CCK溶液。⑤如果没有450nm的滤光片,可以使用吸光度在430-490nm之间的滤光片,但是450nm滤光片的检测灵敏度至高.⑥培养基中酚红的吸光度可以在计算时,通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去,因此不会对检测造成影响。
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WST-1法:形成的formazan的水溶性好,产品性状为溶液,使用方法为无需预制,检测灵敏度很高,检测时间较短,检测波长为420-480nm,细胞毒性很低,细胞形态不变,试剂稳定性一般,非常合适大批量样品检测,便捷程度便捷.CCK法:形成的formazan的水溶性好,产品性状为1瓶溶液,使用方法为无需预制,检测灵敏度高,检测时间很短,检测波长为430-490nm,细胞毒性很低,细胞形态不变,试剂稳定性很好,非常合适大批量样品检测,便捷程度非常便捷。
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)Ⅱ、细胞活性检测在96孔板中接种细胞悬液(100μL/孔).将培养板放在培养箱中预培养(在37℃,5%CO2的条件下)!向每孔加入10μL的CCK溶液(注意不要在孔中生成气泡,它们会影响OD值的读数)。将培养板在培养箱内孵育1-4小时.用酶标仪测定在450nm处的吸光度!如果暂时不测定OD值,打算以后测定的话,可以向每孔中加入10μL0!1M的HCL溶液或者1%w/vSDS溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下!
如果暂时不测定OD值,打算以后测定的话,可以向每孔中加入10μL0.1M的HCL溶液或者1%w/vSDS溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下!在24小时内吸光度不会发生变化。注意:如果待测物质有氧化性或还原性的话,可在加CCK之前更换新鲜培养基(除去培养基,并用培养基洗涤细胞两次,然后加入新的培养基),去掉药物影响!当然药物影响比较小的情况下,可以不更换培养基,直接扣除培养基中加入药物后的空白吸收即可.
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