生化试剂
公司地址:深圳市宝安区新安街道宝民社区创业二路5号建设银行楼创业二路5-1
企业信息
注册资本:50---100万
注册时间: 2018-04-25
细胞增殖及毒性检测CCK试剂盒——CCK8包装规格货号:K009-100、K009-500、K009-1000、K009-3000规格:100T、500T、1000T、3000T储存条件:4℃避光保存,有效期一年!产品说明CellCountingKit简称CCK试剂盒,为MTT法的替代方法,是一种基于WST(水溶性四唑盐,化学名:2-(2-甲氧基-4-硝苯(ben)基)-3-(4-硝苯(ben)基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐)的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒!
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杭州细胞增殖及毒性检测CCK8试剂盒
在24小时内吸光度不会发生变化!Ⅲ、细胞增值-毒性检测在96孔板中配置100μL的细胞悬液!将培养板在培养箱预培养24小时(在37℃,5%CO2的条件下)!向培养板加入10μL不同浓度的待测物质!将培养板在培养箱孵育一段适当的时间(例如:124或48小时)!向每孔加入10μLCCK溶液(注意不要在孔中生成气泡,它们会影响OD值的读数)。将培养板在培养箱内孵育1-4小时。用酶标仪测定在450nm处的吸光度.
WST-1法:形成的formazan的水溶性好,产品性状为溶液,使用方法为无需预制,检测灵敏度很高,检测时间较短,检测波长为420-480nm,细胞毒性很低,细胞形态不变,试剂稳定性一般,非常合适大批量样品检测,便捷程度便捷.CCK法:形成的formazan的水溶性好,产品性状为1瓶溶液,使用方法为无需预制,检测灵敏度高,检测时间很短,检测波长为430-490nm,细胞毒性很低,细胞形态不变,试剂稳定性很好,非常合适大批量样品检测,便捷程度非常便捷!
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)Ⅱ、细胞活性检测在96孔板中接种细胞悬液(100μL/孔).将培养板放在培养箱中预培养(在37℃,5%CO2的条件下)!向每孔加入10μL的CCK溶液(注意不要在孔中生成气泡,它们会影响OD值的读数)!将培养板在培养箱内孵育1-4小时!用酶标仪测定在450nm处的吸光度!如果暂时不测定OD值,打算以后测定的话,可以向每孔中加入10μL0!1M的HCL溶液或者1%w/vSDS溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下!
如果暂时不测定OD值,打算以后测定的话,可以向每孔中加入10μL0。1M的HCL溶液或者1%w/vSDS溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下!在24小时内吸光度不会发生变化!注意:如果待测物质有氧化性或还原性的话,可在加CCK之前更换新鲜培养基(除去培养基,并用培养基洗涤细胞两次,然后加入新的培养基),去掉药物影响!当然药物影响比较小的情况下,可以不更换培养基,直接扣除培养基中加入药物后的空白吸收即可.
CCK法与其它检测方法之间的比较:MTT法:形成的formazan的水溶性差,产品性状为粉末,使用方法为配成溶液后使用,检测灵敏度高,检测时间较长,检测波长为560-600nm,细胞毒性高,细胞形态完全消失,试剂稳定性一般,可以大批量样品检测,便捷程度一般。XTT法:形成的formazan的水溶性好,产品性状为2瓶溶液,使用方法为现配现用,检测灵敏度很高,检测时间较短,检测波长为420-480nm,细胞毒性很低,细胞形态不变,试剂稳定性较差,非常合适大批量样品检测,便捷程度便捷!
CCK用途:药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定等!注意事项:①建议先做几个孔摸索接种细胞的数量和加入CCK试剂后的培养时间。②有条件的情况下建议采用多通道移液器,可以减少平行孔减的差异。加入CCK试剂时,建议斜贴着培养板壁加,不要插到培养基页面下加,容易产生气泡,会干扰OD值读数。③白细胞可能需要培养较长时间!④当使用标准96孔板时,贴壁细胞的至小接种量至少为1,000个/孔(100μL培养基)。
生化试剂
公司地址:深圳市宝安区新安街道宝民社区创业二路5号建设银行楼创业二路5-1
企业信息
注册资本:50---100万
注册时间: 2018-04-25