生化试剂
公司地址:深圳市宝安区新安街道宝民社区创业二路5号建设银行楼创业二路5-1
企业信息
注册资本:50---100万
注册时间: 2018-04-25
CCK法与其它检测方法之间的比较:MTT法:形成的formazan的水溶性差,产品性状为粉末,使用方法为配成溶液后使用,检测灵敏度高,检测时间较长,检测波长为560-600nm,细胞毒性高,细胞形态完全消失,试剂稳定性一般,可以大批量样品检测,便捷程度一般.XTT法:形成的formazan的水溶性好,产品性状为2瓶溶液,使用方法为现配现用,检测灵敏度很高,检测时间较短,检测波长为420-480nm,细胞毒性很低,细胞形态不变,试剂稳定性较差,非常合适大批量样品检测,便捷程度便捷!
WST-1法:形成的formazan的水溶性好,产品性状为溶液,使用方法为无需预制,检测灵敏度很高,检测时间较短,检测波长为420-480nm,细胞毒性很低,细胞形态不变,试剂稳定性一般,非常合适大批量样品检测,便捷程度便捷!CCK法:形成的formazan的水溶性好,产品性状为1瓶溶液,使用方法为无需预制,检测灵敏度高,检测时间很短,检测波长为430-490nm,细胞毒性很低,细胞形态不变,试剂稳定性很好,非常合适大批量样品检测,便捷程度非常便捷!
操作说明Ⅰ、制作标准曲线(测定细胞具体数量时)先用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量,然后接种细胞.按比例(例如:1/2比例)依次用培养基等比稀释成一个细胞浓度梯度,一般要做3-5个细胞浓度梯度,每组3-6个复孔!接种后培养2-4小时使细胞贴壁,然后加CCK试剂培养一定时间后测定OD值,制作出一条以细胞数量为横坐标(X轴),OD值为纵坐标(Y轴)的标准曲线!根据此标准曲线可以测定出未知样品的细胞数量(试用此标准曲线的前提是实验的条件要一致,便于确定细胞的接种数量以及加入CCK后的培养时间!
2018年ZetaLife公司与美国加利福尼亚大学旧金山校区联合开发用于哺乳动物细胞、活体动物转染的AdvancedDNARNA第三代多肽小分子转染试剂,此技术成为新的全球蛋白功能、免疫细胞及干细胞治疗、研发及生产的主要关键技术之一。深圳市安培生物科技有限公司是美国ZETALIFE公司的中国区总代理!精心经营细胞培养品试剂,均经过反复充分验证,产品效果好且重复性佳!尊敬的客户您如在订购过程中遇到任何问题都可以与我司在线客服联系寻求帮助。
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)Ⅱ、细胞活性检测在96孔板中接种细胞悬液(100μL/孔)。将培养板放在培养箱中预培养(在37℃,5%CO2的条件下).向每孔加入10μL的CCK溶液(注意不要在孔中生成气泡,它们会影响OD值的读数)!将培养板在培养箱内孵育1-4小时!用酶标仪测定在450nm处的吸光度!如果暂时不测定OD值,打算以后测定的话,可以向每孔中加入10μL0.1M的HCL溶液或者1%w/vSDS溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下!
检测白细胞时的灵敏度相对较低,因此推荐接种量不低于2,500个/孔(100μL培养基)!如果要使用24孔板或6孔板实验,请先计算每孔相应的接种量,并按照每孔培养基总体积的10%加入CCK溶液!⑤如果没有450nm的滤光片,可以使用吸光度在430-490nm之间的滤光片,但是450nm滤光片的检测灵敏度至高!⑥培养基中酚红的吸光度可以在计算时,通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去,因此不会对检测造成影响!
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在24小时内吸光度不会发生变化!Ⅲ、细胞增值-毒性检测在96孔板中配置100μL的细胞悬液!将培养板在培养箱预培养24小时(在37℃,5%CO2的条件下)!向培养板加入10μL不同浓度的待测物质。将培养板在培养箱孵育一段适当的时间(例如:124或48小时).向每孔加入10μLCCK溶液(注意不要在孔中生成气泡,它们会影响OD值的读数).将培养板在培养箱内孵育1-4小时!用酶标仪测定在450nm处的吸光度.
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生化试剂
公司地址:深圳市宝安区新安街道宝民社区创业二路5号建设银行楼创业二路5-1
企业信息
注册资本:50---100万
注册时间: 2018-04-25