生化试剂
公司地址:深圳市宝安区新安街道宝民社区创业二路5号建设银行楼创业二路5-1
企业信息
注册资本:50---100万
注册时间: 2018-04-25
活力计算:细胞活力*(%)=[A(加药)-A(空白)]/[A(0加药)-A(空白)]×100A(加药):具有细胞、CCK溶液和药物溶液的孔的吸光度A(空白):具有培养基和CCK溶液而没有细胞的孔的吸光度A(0加药):具有细胞、CCK溶液而没有药物溶液的孔的吸光度*细胞活力:细胞增殖活力或细胞毒性活力保存条件:4℃干燥避光保存,有效期一年!仅供科学研究使用,禁止用于它用!ZETALIFE介绍:美国ZETALIFE公司成立于1989年,是国际无血清细胞培养基DMEM/F12主要完成人,有三十几年的胎牛血清、无血清细胞培养基、以及干细胞、免疫细胞及肿瘤细胞等多种不同类型哺乳动物细胞的无血清培养液生产经验;也是目前世界胎牛血清、无血清培养基至大的OEM供应商之一;每批血清均有完整的血源证明文件、兽医师检验证明及品质测试报告;ZETALIFE血清在100级的无菌间采用全自动方式制造生产,具有良好的可再现性及可追溯性!
如果暂时不测定OD值,打算以后测定的话,可以向每孔中加入10μL0!1M的HCL溶液或者1%w/vSDS溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下!在24小时内吸光度不会发生变化。注意:如果待测物质有氧化性或还原性的话,可在加CCK之前更换新鲜培养基(除去培养基,并用培养基洗涤细胞两次,然后加入新的培养基),去掉药物影响!当然药物影响比较小的情况下,可以不更换培养基,直接扣除培养基中加入药物后的空白吸收即可.
深圳常用的CCK8试剂盒说明书介绍
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CCK用途:药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定等!注意事项:①建议先做几个孔摸索接种细胞的数量和加入CCK试剂后的培养时间.②有条件的情况下建议采用多通道移液器,可以减少平行孔减的差异!加入CCK试剂时,建议斜贴着培养板壁加,不要插到培养基页面下加,容易产生气泡,会干扰OD值读数!③白细胞可能需要培养较长时间。④当使用标准96孔板时,贴壁细胞的至小接种量至少为1,000个/孔(100μL培养基)!
检测白细胞时的灵敏度相对较低,因此推荐接种量不低于2,500个/孔(100μL培养基).如果要使用24孔板或6孔板实验,请先计算每孔相应的接种量,并按照每孔培养基总体积的10%加入CCK溶液!⑤如果没有450nm的滤光片,可以使用吸光度在430-490nm之间的滤光片,但是450nm滤光片的检测灵敏度至高。⑥培养基中酚红的吸光度可以在计算时,通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去,因此不会对检测造成影响.
在24小时内吸光度不会发生变化。Ⅲ、细胞增值-毒性检测在96孔板中配置100μL的细胞悬液.将培养板在培养箱预培养24小时(在37℃,5%CO2的条件下).向培养板加入10μL不同浓度的待测物质.将培养板在培养箱孵育一段适当的时间(例如:124或48小时).向每孔加入10μLCCK溶液(注意不要在孔中生成气泡,它们会影响OD值的读数)。将培养板在培养箱内孵育1-4小时!用酶标仪测定在450nm处的吸光度!
)Ⅱ、细胞活性检测在96孔板中接种细胞悬液(100μL/孔)。将培养板放在培养箱中预培养(在37℃,5%CO2的条件下)!向每孔加入10μL的CCK溶液(注意不要在孔中生成气泡,它们会影响OD值的读数)!将培养板在培养箱内孵育1-4小时.用酶标仪测定在450nm处的吸光度。如果暂时不测定OD值,打算以后测定的话,可以向每孔中加入10μL0!1M的HCL溶液或者1%w/vSDS溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下!
生化试剂
公司地址:深圳市宝安区新安街道宝民社区创业二路5号建设银行楼创业二路5-1
企业信息
注册资本:50---100万
注册时间: 2018-04-25