）Ⅱ、细胞活性检测在96孔板中接种细胞悬液（100μL/孔）!将培养板放在培养箱中预培养（在37℃,5%CO2的条件下）.向每孔加入10μL的CCK溶液（注意不要在孔中生成气泡，它们会影响OD值的读数）.将培养板在培养箱内孵育1-4小时！用酶标仪测定在450nm处的吸光度!如果暂时不测定OD值，打算以后测定的话，可以向每孔中加入10μL0.1M的HCL溶液或者1%w/vSDS溶液，并遮盖培养板避光保存在室温条件下！

　　在24小时内吸光度不会发生变化！Ⅲ、细胞增值-毒性检测在96孔板中配置100μL的细胞悬液!将培养板在培养箱预培养24小时（在37℃，5%CO2的条件下）。向培养板加入10μL不同浓度的待测物质.将培养板在培养箱孵育一段适当的时间（例如：124或48小时）！向每孔加入10μLCCK溶液（注意不要在孔中生成气泡，它们会影响OD值的读数）!将培养板在培养箱内孵育1-4小时.用酶标仪测定在450nm处的吸光度.

　　检测白细胞时的灵敏度相对较低，因此推荐接种量不低于2,500个/孔(100μL培养基)!如果要使用24孔板或6孔板实验，请先计算每孔相应的接种量，并按照每孔培养基总体积的10%加入CCK溶液!⑤如果没有450nm的滤光片，可以使用吸光度在430-490nm之间的滤光片，但是450nm滤光片的检测灵敏度至高.⑥培养基中酚红的吸光度可以在计算时，通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去，因此不会对检测造成影响。

　　 我司主营生物化工领域的企业，主要以CCK8试剂盒为主要产品，公司位于深圳市宝安区新安街道宝民社区创业二路5号建设银行楼创业二路5-1，更多产品信息详情请上http://www.ampere168.com查看。深圳市安培生物科技有限公司愿与社会各界朋友共同合作、共创双赢、共创精彩明天！

　　如果暂时不测定OD值，打算以后测定的话，可以向每孔中加入10μL0.1M的HCL溶液或者1%w/vSDS溶液，并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在24小时内吸光度不会发生变化.注意：如果待测物质有氧化性或还原性的话，可在加CCK之前更换新鲜培养基（除去培养基，并用培养基洗涤细胞两次，然后加入新的培养基），去掉药物影响。当然药物影响比较小的情况下，可以不更换培养基，直接扣除培养基中加入药物后的空白吸收即可。

　　活力计算：细胞活力*（％）=[A(加药)-A（空白）]/[A（0加药）-A（空白）]×100A（加药）：具有细胞、CCK溶液和药物溶液的孔的吸光度A（空白）：具有培养基和CCK溶液而没有细胞的孔的吸光度A（0加药）：具有细胞、CCK溶液而没有药物溶液的孔的吸光度*细胞活力：细胞增殖活力或细胞毒性活力保存条件：4℃干燥避光保存，有效期一年.仅供科学研究使用，禁止用于它用!ZETALIFE介绍：美国ZETALIFE公司成立于1989年，是国际无血清细胞培养基DMEM/F12主要完成人，有三十几年的胎牛血清、无血清细胞培养基、以及干细胞、免疫细胞及肿瘤细胞等多种不同类型哺乳动物细胞的无血清培养液生产经验；也是目前世界胎牛血清、无血清培养基至大的OEM供应商之一；每批血清均有完整的血源证明文件、兽医师检验证明及品质测试报告；ZETALIFE血清在100级的无菌间采用全自动方式制造生产，具有良好的可再现性及可追溯性。

　　深圳市安培生物科技有限公司是一家生物化工企业，关于CCK8试剂盒，公司具有多年的从业经验，可以给客户提供多种解决方案， 公司秉承着诚信互惠的经营理念，主营产品细胞增殖及毒性检测CCK8试剂盒获得客户一致好评，如果您想了解细胞增殖及毒性检测CCK8试剂盒的更多细节，请与我们取得联系，深圳市安培生物科技有限公司期待为您提供服务。

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　　操作说明Ⅰ、制作标准曲线（测定细胞具体数量时）先用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量，然后接种细胞。按比例（例如：1/2比例）依次用培养基等比稀释成一个细胞浓度梯度，一般要做3-5个细胞浓度梯度，每组3-6个复孔。接种后培养2-4小时使细胞贴壁，然后加CCK试剂培养一定时间后测定OD值，制作出一条以细胞数量为横坐标（X轴），OD值为纵坐标（Y轴）的标准曲线.根据此标准曲线可以测定出未知样品的细胞数量（试用此标准曲线的前提是实验的条件要一致，便于确定细胞的接种数量以及加入CCK后的培养时间!