）Ⅱ、细胞活性检测在96孔板中接种细胞悬液（100μL/孔）!将培养板放在培养箱中预培养（在37℃,5%CO2的条件下）.向每孔加入10μL的CCK溶液（注意不要在孔中生成气泡，它们会影响OD值的读数）。将培养板在培养箱内孵育1-4小时！用酶标仪测定在450nm处的吸光度！如果暂时不测定OD值，打算以后测定的话，可以向每孔中加入10μL0!1M的HCL溶液或者1%w/vSDS溶液，并遮盖培养板避光保存在室温条件下!

　　细胞增殖及毒性检测CCK试剂盒——CCK8包装规格货号：K009-100、K009-500、K009-1000、K009-3000规格：100T、500T、1000T、3000T储存条件:4℃避光保存，有效期一年！产品说明CellCountingKit简称CCK试剂盒，为MTT法的替代方法，是一种基于WST（水溶性四唑盐，化学名：2-(2-甲氧基-4-硝苯（ben）基)-3-(4-硝苯（ben）基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐）的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒!

　　在24小时内吸光度不会发生变化!Ⅲ、细胞增值-毒性检测在96孔板中配置100μL的细胞悬液！将培养板在培养箱预培养24小时（在37℃，5%CO2的条件下）.向培养板加入10μL不同浓度的待测物质！将培养板在培养箱孵育一段适当的时间（例如：124或48小时）！向每孔加入10μLCCK溶液（注意不要在孔中生成气泡，它们会影响OD值的读数）。将培养板在培养箱内孵育1-4小时！用酶标仪测定在450nm处的吸光度!

检测灵敏度高的CCK8试剂盒毒性结果怎么分析

　　CCK用途：药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定等。注意事项：①建议先做几个孔摸索接种细胞的数量和加入CCK试剂后的培养时间！②有条件的情况下建议采用多通道移液器，可以减少平行孔减的差异!加入CCK试剂时，建议斜贴着培养板壁加，不要插到培养基页面下加，容易产生气泡，会干扰OD值读数!③白细胞可能需要培养较长时间。④当使用标准96孔板时，贴壁细胞的至小接种量至少为1,000个/孔(100μL培养基)!

　　WST-1法：形成的formazan的水溶性好，产品性状为溶液，使用方法为无需预制，检测灵敏度很高，检测时间较短，检测波长为420-480nm，细胞毒性很低,细胞形态不变，试剂稳定性一般，非常合适大批量样品检测，便捷程度便捷.CCK法：形成的formazan的水溶性好，产品性状为1瓶溶液，使用方法为无需预制，检测灵敏度高，检测时间很短，检测波长为430-490nm，细胞毒性很低,细胞形态不变，试剂稳定性很好，非常合适大批量样品检测，便捷程度非常便捷！

　　如果暂时不测定OD值，打算以后测定的话，可以向每孔中加入10μL0!1M的HCL溶液或者1%w/vSDS溶液，并遮盖培养板避光保存在室温条件下！在24小时内吸光度不会发生变化.注意：如果待测物质有氧化性或还原性的话，可在加CCK之前更换新鲜培养基（除去培养基，并用培养基洗涤细胞两次，然后加入新的培养基），去掉药物影响!当然药物影响比较小的情况下，可以不更换培养基，直接扣除培养基中加入药物后的空白吸收即可。