在24小时内吸光度不会发生变化。Ⅲ、细胞增值-毒性检测在96孔板中配置100μL的细胞悬液！将培养板在培养箱预培养24小时（在37℃，5%CO2的条件下）！向培养板加入10μL不同浓度的待测物质。将培养板在培养箱孵育一段适当的时间（例如：124或48小时）。向每孔加入10μLCCK溶液（注意不要在孔中生成气泡，它们会影响OD值的读数）.将培养板在培养箱内孵育1-4小时.用酶标仪测定在450nm处的吸光度.

　　检测白细胞时的灵敏度相对较低，因此推荐接种量不低于2,500个/孔(100μL培养基).如果要使用24孔板或6孔板实验，请先计算每孔相应的接种量，并按照每孔培养基总体积的10%加入CCK溶液.⑤如果没有450nm的滤光片，可以使用吸光度在430-490nm之间的滤光片，但是450nm滤光片的检测灵敏度至高。⑥培养基中酚红的吸光度可以在计算时，通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去，因此不会对检测造成影响！

常用的CCK8试剂盒操作说明

　　 深圳市安培生物科技有限公司，位于深圳市宝安区新安街道宝民社区创业二路5号建设银行楼创业二路5-1。公司主营生物化工行业，如何了解{推广产品}产品信息详情请拔打热线：19126518388华伟。

　　如果暂时不测定OD值，打算以后测定的话，可以向每孔中加入10μL0。1M的HCL溶液或者1%w/vSDS溶液，并遮盖培养板避光保存在室温条件下！在24小时内吸光度不会发生变化！注意：如果待测物质有氧化性或还原性的话，可在加CCK之前更换新鲜培养基（除去培养基，并用培养基洗涤细胞两次，然后加入新的培养基），去掉药物影响.当然药物影响比较小的情况下，可以不更换培养基，直接扣除培养基中加入药物后的空白吸收即可！

　　WST-1法：形成的formazan的水溶性好，产品性状为溶液，使用方法为无需预制，检测灵敏度很高，检测时间较短，检测波长为420-480nm，细胞毒性很低,细胞形态不变，试剂稳定性一般，非常合适大批量样品检测，便捷程度便捷。CCK法：形成的formazan的水溶性好，产品性状为1瓶溶液，使用方法为无需预制，检测灵敏度高，检测时间很短，检测波长为430-490nm，细胞毒性很低,细胞形态不变，试剂稳定性很好，非常合适大批量样品检测，便捷程度非常便捷!

　　操作说明Ⅰ、制作标准曲线（测定细胞具体数量时）先用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量，然后接种细胞！按比例（例如：1/2比例）依次用培养基等比稀释成一个细胞浓度梯度，一般要做3-5个细胞浓度梯度，每组3-6个复孔。接种后培养2-4小时使细胞贴壁，然后加CCK试剂培养一定时间后测定OD值，制作出一条以细胞数量为横坐标（X轴），OD值为纵坐标（Y轴）的标准曲线！根据此标准曲线可以测定出未知样品的细胞数量（试用此标准曲线的前提是实验的条件要一致，便于确定细胞的接种数量以及加入CCK后的培养时间。

　　深圳市安培生物科技有限公司是一家生物化工企业，关于CCK8试剂盒，公司具有多年的从业经验，可以给客户提供多种解决方案， 公司秉承着诚信互惠的经营理念，主营产品细胞增殖及毒性检测CCK8试剂盒获得客户一致好评，如果您想了解细胞增殖及毒性检测CCK8试剂盒的更多细节，请与我们取得联系，深圳市安培生物科技有限公司期待为您提供服务。