细胞转入无血清培养基培养要有一个适应过程，一般要逐步降低血清浓度，从10%减少到5%，3%，1%，直至无血清培养!在降低过程中要注意观察细胞形态是否发生变化，是否有部分细胞死亡，存活细胞是否还保持原有的功能和生物学特性等。在实验后这些细胞一般不再继续保留，很少有细胞能够长期培养于无血清培养基而不发生改变的!细胞转入无血清培养之前，要留有种子细胞，种子细胞按常规培养于含血清的培养基中，以保证细胞的特性不发生变化!

　　特别需要强调的是：配制无血清培养液必须使用高质量的水，如石英玻璃蒸馏器经三次蒸馏或超纯水净化装置制备的水.因为无血清培养基缺乏了血清中天然成分中和毒素、保护细胞的大分子，既便水中的有毒物质含量甚微，也可能对细胞产生致死性损害！这是无血清培养能否成功的关键因素之一!Opti-MEM™I减血清培养基货号:31985070描述Opti-MEMI减血清培养基是一种经过改良的MinimalEssentialMedium(MEM)，能够使胎牛血清添加量减少至少50%，而生长速率或形态无变化。

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　　细胞培养适应替代血清：许多细胞利用连续适应方法能很好的适应，用包含FBS的的培养基和包含有替代血清的培养基1∶1（v∶v）的混合培养基培养细胞!通过下列的混合培养基的方式，连续几代减少当前培养基的量：1∶2，1∶4，1∶16和100Percent替代培养基!每次适应改变血清比例时，传代细胞2到3次。培养可以直接从FBS转换到替代血清。一开始就使用相同于FBS的浓度的替代物或血清，生长的延迟可能会发生，4允许进行2到3次的传代，使生长率恢复到以前的水平！

　　以2倍正常接种密度接种生长活跃的细胞培养物到75%有血清培养基：25%SFM混合培养基中，传代培养。当细胞密度5×10细胞/ml时，以2×10到3×10细胞/ml细胞密度，在有血清培养基：SFM为50∶50的混合培养基中传代培养！以2×10到3×10细胞/ml细胞密度，25%有血清培养基和75%SFM中传代培养.当细胞密度达到1×10到3×10细胞/ml（接种后4到6天），在100PercentSFM培养基中传代培养!

　　Opti-MEM™I减血清培养基货号:31985070无血清培养基的优点可避免血清批次间的质量变动，提高细胞培养和实验结果的重复性！避免血清对细胞的毒性作用和血清源性污染。避免血清组分对实验研究的影响!有利于体外培养细胞的分化.可提高产品的表达水平并使细胞产品易于纯化!缺点：细胞在无血清培养基中易受某些机械因素和化学因素的影响，培养基的保存和应用不如传统的合成培养基方便。成本较高.针对性很强，一种无血清培养基仅适合某一类细胞的培养!

　　每隔3到5天，当细胞密度达到1×10到3×10细胞/ml，细胞活率在90%时，贮备的适应了无血清培养基的细胞培养物应该再次传代培养。建议备份上一次混合培养的培养物，直到每一次细胞适应了新的混合培养基!每一次减少血清前，可能需要在SFM/有血清混合培养基中进行几次传代.在适应过程中，建议不要让细胞生长过度.这将增加选择亚群的可能性。需要注意，与有血清培养基相比，大部分SFM包含非常少的蛋白质，因而更易于受外界因素的影响！