细胞转入无血清培养基培养要有一个适应过程，一般要逐步降低血清浓度，从10%减少到5%，3%，1%，直至无血清培养！在降低过程中要注意观察细胞形态是否发生变化，是否有部分细胞死亡，存活细胞是否还保持原有的功能和生物学特性等！在实验后这些细胞一般不再继续保留，很少有细胞能够长期培养于无血清培养基而不发生改变的。细胞转入无血清培养之前，要留有种子细胞，种子细胞按常规培养于含血清的培养基中，以保证细胞的特性不发生变化!

　　应用：无血清培养基和试剂被广泛的应用于培养哺乳动物和无脊动物细胞以制备单克隆抗体，病毒抗原和重组蛋白等!大多数的无血清产品含有向细胞内转运离子的转铁蛋白和调节葡萄糖摄取量的胰岛素，以及一些蛋白质如清蛋白，纤连蛋白，胎球蛋白等，这些蛋白在细胞培养中发挥各种不同功能，如吸附毒性化合物，抗生物反应器剪切力，提供细胞贴壁所需的基质，作为脂类和其他生长因子的载体等.为了使细胞适应无血清培养，关键的是使所培养细胞：处于对数生长中期90%活细胞率适应时以较高的起始细胞接种细胞适应无血清培养基的方法直接适应——细胞从添加血清的培养基转换到无血清培养基（SFM）中。

　　还推荐Opti-MEMI培养基与阳离子脂质体转染试剂（如Lipofectamine™试剂）配套使用。Opti-MEMI培养基可用于各种悬浮和贴壁的哺乳动物细胞，包括SpAE-CHO、BHK-2HEK和原代成纤维细胞。针对广泛的细胞培养应用，提供了多种组分的Opti-MEMI改良培养基.这种Opti-MEMI的改良方式如下：包含•L-谷氨酰胺•酚红Opti-MEMI培养基的使用Opti-MEMI减血清培养基是一种内含胰岛素、转铁蛋白、次黄嘌呤、胸苷和微量元素的培养基！

　　每隔3到5天，当细胞密度达到1×10到3×10细胞/ml，细胞活率在90%时，贮备的适应了无血清培养基的细胞培养物应该再次传代培养。建议备份上一次混合培养的培养物，直到每一次细胞适应了新的混合培养基!每一次减少血清前，可能需要在SFM/有血清混合培养基中进行几次传代。在适应过程中，建议不要让细胞生长过度.这将增加选择亚群的可能性!需要注意，与有血清培养基相比，大部分SFM包含非常少的蛋白质，因而更易于受外界因素的影响。

　　无血清培养基的基本配方:基本成分为基础培养基及添加组分两大部分。用于生物制药和疫苗生产的细胞在体外培养时，多数呈贴壁生长或兼性贴壁生长；而当其在无血清、无蛋白培养基中生长时，由于缺乏血清中的各种粘附贴壁因子如纤粘连蛋白、层粘连蛋白、胶原、玻表粘连蛋白，细胞往往以悬浮形式生长.使用方法血清仍是动物细胞培养中基本的添加物，尤其是在原代培养或者细胞生长状况不良时，常常会先使用有血清的培养液进行培养，待细胞生长旺盛以后，再换成无血清培养液！

　　深圳市安培生物科技有限公司是一家生物化工企业，关于培养基，公司具有多年的从业经验，可以给客户提供多种解决方案， 公司秉承着诚信互惠的经营理念，主营产品Opti-MEM™ I 减血清培养基获得客户一致好评，如果您想了解Opti-MEM™ I 减血清培养基的更多细节，请与我们取得联系，深圳市安培生物科技有限公司期待为您提供服务。

　　细胞培养适应替代血清：许多细胞利用连续适应方法能很好的适应，用包含FBS的的培养基和包含有替代血清的培养基1∶1（v∶v）的混合培养基培养细胞.通过下列的混合培养基的方式，连续几代减少当前培养基的量：1∶2，1∶4，1∶16和100Percent替代培养基！每次适应改变血清比例时，传代细胞2到3次。培养可以直接从FBS转换到替代血清!一开始就使用相同于FBS的浓度的替代物或血清，生长的延迟可能会发生，4允许进行2到3次的传代，使生长率恢复到以前的水平。

　　以2倍正常接种密度接种生长活跃的细胞培养物到75%有血清培养基：25%SFM混合培养基中，传代培养!当细胞密度5×10细胞/ml时，以2×10到3×10细胞/ml细胞密度，在有血清培养基：SFM为50∶50的混合培养基中传代培养!以2×10到3×10细胞/ml细胞密度，25%有血清培养基和75%SFM中传代培养!当细胞密度达到1×10到3×10细胞/ml（接种后4到6天），在100PercentSFM培养基中传代培养。

无锡Gibco无血清培养基

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