每隔3到5天，当细胞密度达到1×10到3×10细胞/ml，细胞活率在90%时，贮备的适应了无血清培养基的细胞培养物应该再次传代培养。建议备份上一次混合培养的培养物，直到每一次细胞适应了新的混合培养基!每一次减少血清前，可能需要在SFM/有血清混合培养基中进行几次传代!在适应过程中，建议不要让细胞生长过度!这将增加选择亚群的可能性.需要注意，与有血清培养基相比，大部分SFM包含非常少的蛋白质，因而更易于受外界因素的影响!

　　还推荐Opti-MEMI培养基与阳离子脂质体转染试剂（如Lipofectamine™试剂）配套使用！Opti-MEMI培养基可用于各种悬浮和贴壁的哺乳动物细胞，包括SpAE-CHO、BHK-2HEK和原代成纤维细胞!针对广泛的细胞培养应用，提供了多种组分的Opti-MEMI改良培养基！这种Opti-MEMI的改良方式如下：包含•L-谷氨酰胺•酚红Opti-MEMI培养基的使用Opti-MEMI减血清培养基是一种内含胰岛素、转铁蛋白、次黄嘌呤、胸苷和微量元素的培养基!

　　一些类型细胞可直接从包含血清的培养基适应无血清培养基！对于直接适应，接种细胞密度应该:5×10~5×10细胞/ml!当细胞密度达到1×10~3×10细胞/ml时，传代培养细胞！当细胞密度在培养4到7天后达到2×10~4×10细胞/ml时，细胞完全适应了无血清培养基.每隔3~5天，当细胞密度达到1×10~3×10细胞/ml，细胞活率在90%时，贮备的适应了无血清培养基的细胞培养物应该再次传代培养!连续适应——分好几步把细胞从添加血清的培养基转换到无血清培养基（SFM）中，与直接适应相比较，连续适应趋向对于细胞更加温和一些!

南京赛默飞减血清培养基代理

　　特别需要强调的是：配制无血清培养液必须使用高质量的水，如石英玻璃蒸馏器经三次蒸馏或超纯水净化装置制备的水!因为无血清培养基缺乏了血清中天然成分中和毒素、保护细胞的大分子，既便水中的有毒物质含量甚微，也可能对细胞产生致死性损害。这是无血清培养能否成功的关键因素之一！Opti-MEM™I减血清培养基货号:31985070描述Opti-MEMI减血清培养基是一种经过改良的MinimalEssentialMedium(MEM)，能够使胎牛血清添加量减少至少50%，而生长速率或形态无变化!

　　以2倍正常接种密度接种生长活跃的细胞培养物到75%有血清培养基：25%SFM混合培养基中，传代培养！当细胞密度5×10细胞/ml时，以2×10到3×10细胞/ml细胞密度，在有血清培养基：SFM为50∶50的混合培养基中传代培养!以2×10到3×10细胞/ml细胞密度，25%有血清培养基和75%SFM中传代培养.当细胞密度达到1×10到3×10细胞/ml（接种后4到6天），在100PercentSFM培养基中传代培养!

　　这些附加组分可使血清添加量减少至少50%！Opti-MEMI培养基使用碳酸氢钠缓冲体系(4g/L)，因此需要5–10%CO2的环境来维持生理pH值!cGMP生产和质量体系Opti-MEMI在位于纽约格兰德岛上符合cGMP要求的工厂内生产.该工厂是在FDA登记的医疗器械生产商，且通过ISO13485标准认证！为确保供应链的稳定，同时提供由苏格兰工厂生产的同等Opti-MEMI产品(31985-047).