生化试剂
公司地址:深圳市宝安区新安街道宝民社区创业二路5号建设银行楼创业二路5-1
企业信息
注册资本:50---100万
注册时间: 2018-04-25
这些附加组分可使血清添加量减少至少50%。Opti-MEMI培养基使用碳酸氢钠缓冲体系(4g/L),因此需要5–10%CO2的环境来维持生理pH值!cGMP生产和质量体系Opti-MEMI在位于纽约格兰德岛上符合cGMP要求的工厂内生产.该工厂是在FDA登记的医疗器械生产商,且通过ISO13485标准认证!为确保供应链的稳定,同时提供由苏格兰工厂生产的同等Opti-MEMI产品(31985-047)!
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特别需要强调的是:配制无血清培养液必须使用高质量的水,如石英玻璃蒸馏器经三次蒸馏或超纯水净化装置制备的水.因为无血清培养基缺乏了血清中天然成分中和毒素、保护细胞的大分子,既便水中的有毒物质含量甚微,也可能对细胞产生致死性损害!这是无血清培养能否成功的关键因素之一!Opti-MEM™I减血清培养基货号:31985070描述Opti-MEMI减血清培养基是一种经过改良的MinimalEssentialMedium(MEM),能够使胎牛血清添加量减少至少50%,而生长速率或形态无变化。
细胞培养适应替代血清:许多细胞利用连续适应方法能很好的适应,用包含FBS的的培养基和包含有替代血清的培养基1∶1(v∶v)的混合培养基培养细胞!通过下列的混合培养基的方式,连续几代减少当前培养基的量:1∶2,1∶4,1∶16和100Percent替代培养基!每次适应改变血清比例时,传代细胞2到3次.培养可以直接从FBS转换到替代血清!一开始就使用相同于FBS的浓度的替代物或血清,生长的延迟可能会发生,4允许进行2到3次的传代,使生长率恢复到以前的水平!
以2倍正常接种密度接种生长活跃的细胞培养物到75%有血清培养基:25%SFM混合培养基中,传代培养.当细胞密度5×10细胞/ml时,以2×10到3×10细胞/ml细胞密度,在有血清培养基:SFM为50∶50的混合培养基中传代培养!以2×10到3×10细胞/ml细胞密度,25%有血清培养基和75%SFM中传代培养!当细胞密度达到1×10到3×10细胞/ml(接种后4到6天),在100PercentSFM培养基中传代培养.
Opti-MEM™I减血清培养基货号:31985070无血清培养基的优点可避免血清批次间的质量变动,提高细胞培养和实验结果的重复性!避免血清对细胞的毒性作用和血清源性污染!避免血清组分对实验研究的影响!有利于体外培养细胞的分化.可提高产品的表达水平并使细胞产品易于纯化!缺点:细胞在无血清培养基中易受某些机械因素和化学因素的影响,培养基的保存和应用不如传统的合成培养基方便。成本较高!针对性很强,一种无血清培养基仅适合某一类细胞的培养。
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细胞转入无血清培养基培养要有一个适应过程,一般要逐步降低血清浓度,从10%减少到5%,3%,1%,直至无血清培养!在降低过程中要注意观察细胞形态是否发生变化,是否有部分细胞死亡,存活细胞是否还保持原有的功能和生物学特性等。在实验后这些细胞一般不再继续保留,很少有细胞能够长期培养于无血清培养基而不发生改变的!细胞转入无血清培养之前,要留有种子细胞,种子细胞按常规培养于含血清的培养基中,以保证细胞的特性不发生变化!
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