以2倍正常接种密度接种生长活跃的细胞培养物到75%有血清培养基：25%SFM混合培养基中，传代培养.当细胞密度5×10细胞/ml时，以2×10到3×10细胞/ml细胞密度，在有血清培养基：SFM为50∶50的混合培养基中传代培养。以2×10到3×10细胞/ml细胞密度，25%有血清培养基和75%SFM中传代培养！当细胞密度达到1×10到3×10细胞/ml（接种后4到6天），在100PercentSFM培养基中传代培养！

　　无血清培养基的基本配方:基本成分为基础培养基及添加组分两大部分。用于生物制药和疫苗生产的细胞在体外培养时，多数呈贴壁生长或兼性贴壁生长；而当其在无血清、无蛋白培养基中生长时，由于缺乏血清中的各种粘附贴壁因子如纤粘连蛋白、层粘连蛋白、胶原、玻表粘连蛋白，细胞往往以悬浮形式生长!使用方法血清仍是动物细胞培养中基本的添加物，尤其是在原代培养或者细胞生长状况不良时，常常会先使用有血清的培养液进行培养，待细胞生长旺盛以后，再换成无血清培养液!

　　Opti-MEM™I减血清培养基货号:31985070无血清培养基的优点可避免血清批次间的质量变动，提高细胞培养和实验结果的重复性!避免血清对细胞的毒性作用和血清源性污染。避免血清组分对实验研究的影响！有利于体外培养细胞的分化！可提高产品的表达水平并使细胞产品易于纯化。缺点：细胞在无血清培养基中易受某些机械因素和化学因素的影响，培养基的保存和应用不如传统的合成培养基方便!成本较高.针对性很强，一种无血清培养基仅适合某一类细胞的培养!

　　Opti-MEM™I减血清培养基货号:31985070无血清培养基和试剂被广泛的应用于培养哺乳动物和无脊椎动物细胞以制备单克隆抗体，病毒抗原和重组蛋白等!大多数的无血清培养基含有向细胞内转运离子的转铁蛋白和调节葡萄糖摄取量的胰岛素，以及一些蛋白质和清蛋白，纤维蛋白，胎球蛋白等，这些蛋白在细胞培养中发挥各种不同的功能，如提供细胞贴壁所需的基质，抗生物反应器剪切力，作为脂质和其他生长分化因子的载体等!无血清培养基是不需要添加血清就可以维持细胞在体外较长时间生长繁殖的合成培养基！

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　　应用：无血清培养基和试剂被广泛的应用于培养哺乳动物和无脊动物细胞以制备单克隆抗体，病毒抗原和重组蛋白等！大多数的无血清产品含有向细胞内转运离子的转铁蛋白和调节葡萄糖摄取量的胰岛素，以及一些蛋白质如清蛋白，纤连蛋白，胎球蛋白等，这些蛋白在细胞培养中发挥各种不同功能，如吸附毒性化合物，抗生物反应器剪切力，提供细胞贴壁所需的基质，作为脂类和其他生长因子的载体等!为了使细胞适应无血清培养，关键的是使所培养细胞：处于对数生长中期90%活细胞率适应时以较高的起始细胞接种细胞适应无血清培养基的方法直接适应——细胞从添加血清的培养基转换到无血清培养基（SFM）中。

　　细胞转入无血清培养基培养要有一个适应过程，一般要逐步降低血清浓度，从10%减少到5%，3%，1%，直至无血清培养。在降低过程中要注意观察细胞形态是否发生变化，是否有部分细胞死亡，存活细胞是否还保持原有的功能和生物学特性等!在实验后这些细胞一般不再继续保留，很少有细胞能够长期培养于无血清培养基而不发生改变的！细胞转入无血清培养之前，要留有种子细胞，种子细胞按常规培养于含血清的培养基中，以保证细胞的特性不发生变化！ 　　近日，天津市农机研究所与大港农机推广站协作，在滨海新区现代蕈菌科技园建成了一条废菌棒脱袋、袋料分离、粉碎处理机械化生产线，该生产线可使袋料分离彻底，生产效率达每小时15吨，基质粉碎效果好。该生产线对废菌棒套袋进行回收再利用，避免白色污染；废菌棒基质进行无害化处理，可以作为培养基质再次使用，降低食用菌生产成本，也可以制成有机肥，施用于农田，改良土壤。该生产线真正的让废弃资源“活”了起来，环境效益和经济效益得以齐头并进，将有利于天津食用菌产业持续健康发展。