生化试剂
公司地址:深圳市宝安区新安街道宝民社区创业二路5号建设银行楼创业二路5-1
企业信息
注册资本:50---100万
注册时间: 2018-04-25
无血清培养基的基本配方:基本成分为基础培养基及添加组分两大部分.用于生物制药和疫苗生产的细胞在体外培养时,多数呈贴壁生长或兼性贴壁生长;而当其在无血清、无蛋白培养基中生长时,由于缺乏血清中的各种粘附贴壁因子如纤粘连蛋白、层粘连蛋白、胶原、玻表粘连蛋白,细胞往往以悬浮形式生长!使用方法血清仍是动物细胞培养中基本的添加物,尤其是在原代培养或者细胞生长状况不良时,常常会先使用有血清的培养液进行培养,待细胞生长旺盛以后,再换成无血清培养液.
这些附加组分可使血清添加量减少至少50%!Opti-MEMI培养基使用碳酸氢钠缓冲体系(4g/L),因此需要5–10%CO2的环境来维持生理pH值。cGMP生产和质量体系Opti-MEMI在位于纽约格兰德岛上符合cGMP要求的工厂内生产。该工厂是在FDA登记的医疗器械生产商,且通过ISO13485标准认证。为确保供应链的稳定,同时提供由苏格兰工厂生产的同等Opti-MEMI产品(31985-047)。
细胞培养适应替代血清:许多细胞利用连续适应方法能很好的适应,用包含FBS的的培养基和包含有替代血清的培养基1∶1(v∶v)的混合培养基培养细胞。通过下列的混合培养基的方式,连续几代减少当前培养基的量:1∶2,1∶4,1∶16和100Percent替代培养基!每次适应改变血清比例时,传代细胞2到3次.培养可以直接从FBS转换到替代血清!一开始就使用相同于FBS的浓度的替代物或血清,生长的延迟可能会发生,4允许进行2到3次的传代,使生长率恢复到以前的水平!
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应用:无血清培养基和试剂被广泛的应用于培养哺乳动物和无脊动物细胞以制备单克隆抗体,病毒抗原和重组蛋白等。大多数的无血清产品含有向细胞内转运离子的转铁蛋白和调节葡萄糖摄取量的胰岛素,以及一些蛋白质如清蛋白,纤连蛋白,胎球蛋白等,这些蛋白在细胞培养中发挥各种不同功能,如吸附毒性化合物,抗生物反应器剪切力,提供细胞贴壁所需的基质,作为脂类和其他生长因子的载体等!为了使细胞适应无血清培养,关键的是使所培养细胞:处于对数生长中期90%活细胞率适应时以较高的起始细胞接种细胞适应无血清培养基的方法直接适应——细胞从添加血清的培养基转换到无血清培养基(SFM)中!
以2倍正常接种密度接种生长活跃的细胞培养物到75%有血清培养基:25%SFM混合培养基中,传代培养!当细胞密度5×10细胞/ml时,以2×10到3×10细胞/ml细胞密度,在有血清培养基:SFM为50∶50的混合培养基中传代培养!以2×10到3×10细胞/ml细胞密度,25%有血清培养基和75%SFM中传代培养!当细胞密度达到1×10到3×10细胞/ml(接种后4到6天),在100PercentSFM培养基中传代培养!
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