生化试剂
公司地址:深圳市宝安区新安街道宝民社区创业二路5号建设银行楼创业二路5-1
企业信息
注册资本:50---100万
注册时间: 2018-04-25
Opti-MEM™I减血清培养基货号:31985070无血清培养基的优点可避免血清批次间的质量变动,提高细胞培养和实验结果的重复性!避免血清对细胞的毒性作用和血清源性污染!避免血清组分对实验研究的影响!有利于体外培养细胞的分化!可提高产品的表达水平并使细胞产品易于纯化!缺点:细胞在无血清培养基中易受某些机械因素和化学因素的影响,培养基的保存和应用不如传统的合成培养基方便.成本较高!针对性很强,一种无血清培养基仅适合某一类细胞的培养!
细胞培养适应替代血清:许多细胞利用连续适应方法能很好的适应,用包含FBS的的培养基和包含有替代血清的培养基1∶1(v∶v)的混合培养基培养细胞。通过下列的混合培养基的方式,连续几代减少当前培养基的量:1∶2,1∶4,1∶16和100Percent替代培养基.每次适应改变血清比例时,传代细胞2到3次!培养可以直接从FBS转换到替代血清.一开始就使用相同于FBS的浓度的替代物或血清,生长的延迟可能会发生,4允许进行2到3次的传代,使生长率恢复到以前的水平.
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特别需要强调的是:配制无血清培养液必须使用高质量的水,如石英玻璃蒸馏器经三次蒸馏或超纯水净化装置制备的水。因为无血清培养基缺乏了血清中天然成分中和毒素、保护细胞的大分子,既便水中的有毒物质含量甚微,也可能对细胞产生致死性损害。这是无血清培养能否成功的关键因素之Opti-MEM™I减血清培养基货号:31985070描述Opti-MEMI减血清培养基是一种经过改良的MinimalEssentialMedium(MEM),能够使胎牛血清添加量减少至少50%,而生长速率或形态无变化!
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Opti-MEM™I减血清培养基货号:31985070无血清培养基和试剂被广泛的应用于培养哺乳动物和无脊椎动物细胞以制备单克隆抗体,病毒抗原和重组蛋白等!大多数的无血清培养基含有向细胞内转运离子的转铁蛋白和调节葡萄糖摄取量的胰岛素,以及一些蛋白质和清蛋白,纤维蛋白,胎球蛋白等,这些蛋白在细胞培养中发挥各种不同的功能,如提供细胞贴壁所需的基质,抗生物反应器剪切力,作为脂质和其他生长分化因子的载体等.无血清培养基是不需要添加血清就可以维持细胞在体外较长时间生长繁殖的合成培养基.
这些附加组分可使血清添加量减少至少50%!Opti-MEMI培养基使用碳酸氢钠缓冲体系(4g/L),因此需要5–10%CO2的环境来维持生理pH值!cGMP生产和质量体系Opti-MEMI在位于纽约格兰德岛上符合cGMP要求的工厂内生产!该工厂是在FDA登记的医疗器械生产商,且通过ISO13485标准认证.为确保供应链的稳定,同时提供由苏格兰工厂生产的同等Opti-MEMI产品(31985-047).
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无血清培养基的基本配方:基本成分为基础培养基及添加组分两大部分!用于生物制药和疫苗生产的细胞在体外培养时,多数呈贴壁生长或兼性贴壁生长;而当其在无血清、无蛋白培养基中生长时,由于缺乏血清中的各种粘附贴壁因子如纤粘连蛋白、层粘连蛋白、胶原、玻表粘连蛋白,细胞往往以悬浮形式生长!使用方法血清仍是动物细胞培养中基本的添加物,尤其是在原代培养或者细胞生长状况不良时,常常会先使用有血清的培养液进行培养,待细胞生长旺盛以后,再换成无血清培养液!
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每隔3到5天,当细胞密度达到1×10到3×10细胞/ml,细胞活率在90%时,贮备的适应了无血清培养基的细胞培养物应该再次传代培养。建议备份上一次混合培养的培养物,直到每一次细胞适应了新的混合培养基。每一次减少血清前,可能需要在SFM/有血清混合培养基中进行几次传代!在适应过程中,建议不要让细胞生长过度.这将增加选择亚群的可能性!需要注意,与有血清培养基相比,大部分SFM包含非常少的蛋白质,因而更易于受外界因素的影响!
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