每隔3到5天，当细胞密度达到1×10到3×10细胞/ml，细胞活率在90%时，贮备的适应了无血清培养基的细胞培养物应该再次传代培养.建议备份上一次混合培养的培养物，直到每一次细胞适应了新的混合培养基!每一次减少血清前，可能需要在SFM/有血清混合培养基中进行几次传代.在适应过程中，建议不要让细胞生长过度。这将增加选择亚群的可能性!需要注意，与有血清培养基相比，大部分SFM包含非常少的蛋白质，因而更易于受外界因素的影响。

　　特别需要强调的是：配制无血清培养液必须使用高质量的水，如石英玻璃蒸馏器经三次蒸馏或超纯水净化装置制备的水.因为无血清培养基缺乏了血清中天然成分中和毒素、保护细胞的大分子，既便水中的有毒物质含量甚微，也可能对细胞产生致死性损害！这是无血清培养能否成功的关键因素之一。Opti-MEM™I减血清培养基货号:31985070描述Opti-MEMI减血清培养基是一种经过改良的MinimalEssentialMedium(MEM)，能够使胎牛血清添加量减少至少50%，而生长速率或形态无变化。

　　Opti-MEM™I减血清培养基货号:31985070无血清培养基的优点可避免血清批次间的质量变动，提高细胞培养和实验结果的重复性！避免血清对细胞的毒性作用和血清源性污染。避免血清组分对实验研究的影响！有利于体外培养细胞的分化.可提高产品的表达水平并使细胞产品易于纯化.缺点：细胞在无血清培养基中易受某些机械因素和化学因素的影响，培养基的保存和应用不如传统的合成培养基方便！成本较高！针对性很强，一种无血清培养基仅适合某一类细胞的培养！

南京Gibco无血清培养基

　　这些附加组分可使血清添加量减少至少50%!Opti-MEMI培养基使用碳酸氢钠缓冲体系(4g/L)，因此需要5–10%CO2的环境来维持生理pH值.cGMP生产和质量体系Opti-MEMI在位于纽约格兰德岛上符合cGMP要求的工厂内生产!该工厂是在FDA登记的医疗器械生产商，且通过ISO13485标准认证!为确保供应链的稳定，同时提供由苏格兰工厂生产的同等Opti-MEMI产品(31985-047)!

　　无血清培养基的基本配方:基本成分为基础培养基及添加组分两大部分。用于生物制药和疫苗生产的细胞在体外培养时，多数呈贴壁生长或兼性贴壁生长；而当其在无血清、无蛋白培养基中生长时，由于缺乏血清中的各种粘附贴壁因子如纤粘连蛋白、层粘连蛋白、胶原、玻表粘连蛋白，细胞往往以悬浮形式生长!使用方法血清仍是动物细胞培养中基本的添加物，尤其是在原代培养或者细胞生长状况不良时，常常会先使用有血清的培养液进行培养，待细胞生长旺盛以后，再换成无血清培养液！

　　细胞培养适应替代血清：许多细胞利用连续适应方法能很好的适应，用包含FBS的的培养基和包含有替代血清的培养基1∶1（v∶v）的混合培养基培养细胞。通过下列的混合培养基的方式，连续几代减少当前培养基的量：1∶2，1∶4，1∶16和100Percent替代培养基!每次适应改变血清比例时，传代细胞2到3次。培养可以直接从FBS转换到替代血清!一开始就使用相同于FBS的浓度的替代物或血清，生长的延迟可能会发生，4允许进行2到3次的传代，使生长率恢复到以前的水平！