生化试剂
公司地址:深圳市宝安区新安街道宝民社区创业二路5号建设银行楼创业二路5-1
企业信息
注册资本:50---100万
注册时间: 2018-04-25
还推荐Opti-MEMI培养基与阳离子脂质体转染试剂(如Lipofectamine™试剂)配套使用。Opti-MEMI培养基可用于各种悬浮和贴壁的哺乳动物细胞,包括SpAE-CHO、BHK-2HEK和原代成纤维细胞。针对广泛的细胞培养应用,提供了多种组分的Opti-MEMI改良培养基!这种Opti-MEMI的改良方式如下:包含•L-谷氨酰胺•酚红Opti-MEMI培养基的使用Opti-MEMI减血清培养基是一种内含胰岛素、转铁蛋白、次黄嘌呤、胸苷和微量元素的培养基.
应用:无血清培养基和试剂被广泛的应用于培养哺乳动物和无脊动物细胞以制备单克隆抗体,病毒抗原和重组蛋白等。大多数的无血清产品含有向细胞内转运离子的转铁蛋白和调节葡萄糖摄取量的胰岛素,以及一些蛋白质如清蛋白,纤连蛋白,胎球蛋白等,这些蛋白在细胞培养中发挥各种不同功能,如吸附毒性化合物,抗生物反应器剪切力,提供细胞贴壁所需的基质,作为脂类和其他生长因子的载体等。为了使细胞适应无血清培养,关键的是使所培养细胞:处于对数生长中期90%活细胞率适应时以较高的起始细胞接种细胞适应无血清培养基的方法直接适应——细胞从添加血清的培养基转换到无血清培养基(SFM)中.
如果您想了解Opti-MEM™ I 减血清培养基更多信息,请致电 华伟:19126518388,或者您直接到我们公司总部一起交流研讨,地址:深圳市宝安区新安街道宝民社区创业二路5号建设银行楼创业二路5-1,我们期待您的致电或来访。
一些类型细胞可直接从包含血清的培养基适应无血清培养基.对于直接适应,接种细胞密度应该:5×10~5×10细胞/ml.当细胞密度达到1×10~3×10细胞/ml时,传代培养细胞.当细胞密度在培养4到7天后达到2×10~4×10细胞/ml时,细胞完全适应了无血清培养基.每隔3~5天,当细胞密度达到1×10~3×10细胞/ml,细胞活率在90%时,贮备的适应了无血清培养基的细胞培养物应该再次传代培养。连续适应——分好几步把细胞从添加血清的培养基转换到无血清培养基(SFM)中,与直接适应相比较,连续适应趋向对于细胞更加温和一些!
细胞转入无血清培养基培养要有一个适应过程,一般要逐步降低血清浓度,从10%减少到5%,3%,1%,直至无血清培养!在降低过程中要注意观察细胞形态是否发生变化,是否有部分细胞死亡,存活细胞是否还保持原有的功能和生物学特性等!在实验后这些细胞一般不再继续保留,很少有细胞能够长期培养于无血清培养基而不发生改变的!细胞转入无血清培养之前,要留有种子细胞,种子细胞按常规培养于含血清的培养基中,以保证细胞的特性不发生变化.
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每隔3到5天,当细胞密度达到1×10到3×10细胞/ml,细胞活率在90%时,贮备的适应了无血清培养基的细胞培养物应该再次传代培养!建议备份上一次混合培养的培养物,直到每一次细胞适应了新的混合培养基!每一次减少血清前,可能需要在SFM/有血清混合培养基中进行几次传代!在适应过程中,建议不要让细胞生长过度.这将增加选择亚群的可能性.需要注意,与有血清培养基相比,大部分SFM包含非常少的蛋白质,因而更易于受外界因素的影响!
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这些附加组分可使血清添加量减少至少50%!Opti-MEMI培养基使用碳酸氢钠缓冲体系(4g/L),因此需要5–10%CO2的环境来维持生理pH值!cGMP生产和质量体系Opti-MEMI在位于纽约格兰德岛上符合cGMP要求的工厂内生产!该工厂是在FDA登记的医疗器械生产商,且通过ISO13485标准认证!为确保供应链的稳定,同时提供由苏格兰工厂生产的同等Opti-MEMI产品(31985-047)!
特别需要强调的是:配制无血清培养液必须使用高质量的水,如石英玻璃蒸馏器经三次蒸馏或超纯水净化装置制备的水.因为无血清培养基缺乏了血清中天然成分中和毒素、保护细胞的大分子,既便水中的有毒物质含量甚微,也可能对细胞产生致死性损害。这是无血清培养能否成功的关键因素之一!Opti-MEM™I减血清培养基货号:31985070描述Opti-MEMI减血清培养基是一种经过改良的MinimalEssentialMedium(MEM),能够使胎牛血清添加量减少至少50%,而生长速率或形态无变化!
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