生化试剂
公司地址:深圳市宝安区新安街道宝民社区创业二路5号建设银行楼创业二路5-1
企业信息
注册资本:50---100万
注册时间: 2018-04-25
Opti-MEM™I减血清培养基货号:31985070无血清培养基和试剂被广泛的应用于培养哺乳动物和无脊椎动物细胞以制备单克隆抗体,病毒抗原和重组蛋白等.大多数的无血清培养基含有向细胞内转运离子的转铁蛋白和调节葡萄糖摄取量的胰岛素,以及一些蛋白质和清蛋白,纤维蛋白,胎球蛋白等,这些蛋白在细胞培养中发挥各种不同的功能,如提供细胞贴壁所需的基质,抗生物反应器剪切力,作为脂质和其他生长分化因子的载体等!无血清培养基是不需要添加血清就可以维持细胞在体外较长时间生长繁殖的合成培养基。
特别需要强调的是:配制无血清培养液必须使用高质量的水,如石英玻璃蒸馏器经三次蒸馏或超纯水净化装置制备的水。因为无血清培养基缺乏了血清中天然成分中和毒素、保护细胞的大分子,既便水中的有毒物质含量甚微,也可能对细胞产生致死性损害。这是无血清培养能否成功的关键因素之一!Opti-MEM™I减血清培养基货号:31985070描述Opti-MEMI减血清培养基是一种经过改良的MinimalEssentialMedium(MEM),能够使胎牛血清添加量减少至少50%,而生长速率或形态无变化!
应用:无血清培养基和试剂被广泛的应用于培养哺乳动物和无脊动物细胞以制备单克隆抗体,病毒抗原和重组蛋白等!大多数的无血清产品含有向细胞内转运离子的转铁蛋白和调节葡萄糖摄取量的胰岛素,以及一些蛋白质如清蛋白,纤连蛋白,胎球蛋白等,这些蛋白在细胞培养中发挥各种不同功能,如吸附毒性化合物,抗生物反应器剪切力,提供细胞贴壁所需的基质,作为脂类和其他生长因子的载体等。为了使细胞适应无血清培养,关键的是使所培养细胞:处于对数生长中期90%活细胞率适应时以较高的起始细胞接种细胞适应无血清培养基的方法直接适应——细胞从添加血清的培养基转换到无血清培养基(SFM)中!
Opti-MEM™I减血清培养基货号:31985070无血清培养基的优点可避免血清批次间的质量变动,提高细胞培养和实验结果的重复性!避免血清对细胞的毒性作用和血清源性污染。避免血清组分对实验研究的影响!有利于体外培养细胞的分化。可提高产品的表达水平并使细胞产品易于纯化!缺点:细胞在无血清培养基中易受某些机械因素和化学因素的影响,培养基的保存和应用不如传统的合成培养基方便.成本较高!针对性很强,一种无血清培养基仅适合某一类细胞的培养!
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细胞转入无血清培养基培养要有一个适应过程,一般要逐步降低血清浓度,从10%减少到5%,3%,1%,直至无血清培养!在降低过程中要注意观察细胞形态是否发生变化,是否有部分细胞死亡,存活细胞是否还保持原有的功能和生物学特性等。在实验后这些细胞一般不再继续保留,很少有细胞能够长期培养于无血清培养基而不发生改变的.细胞转入无血清培养之前,要留有种子细胞,种子细胞按常规培养于含血清的培养基中,以保证细胞的特性不发生变化!
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无血清培养基的基本配方:基本成分为基础培养基及添加组分两大部分。用于生物制药和疫苗生产的细胞在体外培养时,多数呈贴壁生长或兼性贴壁生长;而当其在无血清、无蛋白培养基中生长时,由于缺乏血清中的各种粘附贴壁因子如纤粘连蛋白、层粘连蛋白、胶原、玻表粘连蛋白,细胞往往以悬浮形式生长!使用方法血清仍是动物细胞培养中基本的添加物,尤其是在原代培养或者细胞生长状况不良时,常常会先使用有血清的培养液进行培养,待细胞生长旺盛以后,再换成无血清培养液.
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这些附加组分可使血清添加量减少至少50%。Opti-MEMI培养基使用碳酸氢钠缓冲体系(4g/L),因此需要5–10%CO2的环境来维持生理pH值!cGMP生产和质量体系Opti-MEMI在位于纽约格兰德岛上符合cGMP要求的工厂内生产!该工厂是在FDA登记的医疗器械生产商,且通过ISO13485标准认证。为确保供应链的稳定,同时提供由苏格兰工厂生产的同等Opti-MEMI产品(31985-047)。
答:只要培养基与西林瓶所有接触面接触过就可以,无论正立、倒立或平放。行内有三种做法:一是培养基模拟灌装结束,正常的培养,不需要倒置,培养基培养期间,瓶子里的任何表面都要被培养基接触到,翻转几次就可以了;二是将培养液与西林瓶和胶塞充分接触,然后一半倒立培养、一半正立培养;三是将培养液与西林瓶和胶塞充分接触,在20-25度正立培养7天,30-35度倒立培养7天。指南征求稿中是第一种,就是培养前,对模拟灌装产品进行颠倒、轻摇以使培养基接触所有内表面,再正立培养,开始培养后不应再进行反转等干扰。我们是第二种和第三种的混合,如先将灌装制品按不同批号区分,同一批号不同板层的灌装制品也需分开放置(小批号样品一半正立放置、一半倒立放置),装入中转筐中,先置20-25℃培养7天,进行目检,将正立转成倒立,将倒立转成正立,将再置30-35℃培养7天。生化试剂
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