每隔3到5天，当细胞密度达到1×10到3×10细胞/ml，细胞活率在90%时，贮备的适应了无血清培养基的细胞培养物应该再次传代培养.建议备份上一次混合培养的培养物，直到每一次细胞适应了新的混合培养基!每一次减少血清前，可能需要在SFM/有血清混合培养基中进行几次传代。在适应过程中，建议不要让细胞生长过度。这将增加选择亚群的可能性!需要注意，与有血清培养基相比，大部分SFM包含非常少的蛋白质，因而更易于受外界因素的影响。

　　细胞转入无血清培养基培养要有一个适应过程，一般要逐步降低血清浓度，从10%减少到5%，3%，1%，直至无血清培养。在降低过程中要注意观察细胞形态是否发生变化，是否有部分细胞死亡，存活细胞是否还保持原有的功能和生物学特性等.在实验后这些细胞一般不再继续保留，很少有细胞能够长期培养于无血清培养基而不发生改变的!细胞转入无血清培养之前，要留有种子细胞，种子细胞按常规培养于含血清的培养基中，以保证细胞的特性不发生变化！

　　特别需要强调的是：配制无血清培养液必须使用高质量的水，如石英玻璃蒸馏器经三次蒸馏或超纯水净化装置制备的水！因为无血清培养基缺乏了血清中天然成分中和毒素、保护细胞的大分子，既便水中的有毒物质含量甚微，也可能对细胞产生致死性损害！这是无血清培养能否成功的关键因素之一。Opti-MEM™I减血清培养基货号:31985070描述Opti-MEMI减血清培养基是一种经过改良的MinimalEssentialMedium(MEM)，能够使胎牛血清添加量减少至少50%，而生长速率或形态无变化!

无锡细胞培养广泛应用的减血清培养基哪家好

　　细胞培养适应替代血清：许多细胞利用连续适应方法能很好的适应，用包含FBS的的培养基和包含有替代血清的培养基1∶1（v∶v）的混合培养基培养细胞！通过下列的混合培养基的方式，连续几代减少当前培养基的量：1∶2，1∶4，1∶16和100Percent替代培养基。每次适应改变血清比例时，传代细胞2到3次.培养可以直接从FBS转换到替代血清。一开始就使用相同于FBS的浓度的替代物或血清，生长的延迟可能会发生，4允许进行2到3次的传代，使生长率恢复到以前的水平!

　　一些类型细胞可直接从包含血清的培养基适应无血清培养基.对于直接适应，接种细胞密度应该:5×10~5×10细胞/ml。当细胞密度达到1×10~3×10细胞/ml时，传代培养细胞.当细胞密度在培养4到7天后达到2×10~4×10细胞/ml时，细胞完全适应了无血清培养基。每隔3~5天，当细胞密度达到1×10~3×10细胞/ml，细胞活率在90%时，贮备的适应了无血清培养基的细胞培养物应该再次传代培养。连续适应——分好几步把细胞从添加血清的培养基转换到无血清培养基（SFM）中，与直接适应相比较，连续适应趋向对于细胞更加温和一些。

　　还推荐Opti-MEMI培养基与阳离子脂质体转染试剂（如Lipofectamine™试剂）配套使用.Opti-MEMI培养基可用于各种悬浮和贴壁的哺乳动物细胞，包括SpAE-CHO、BHK-2HEK和原代成纤维细胞.针对广泛的细胞培养应用，提供了多种组分的Opti-MEMI改良培养基!这种Opti-MEMI的改良方式如下：包含•L-谷氨酰胺•酚红Opti-MEMI培养基的使用Opti-MEMI减血清培养基是一种内含胰岛素、转铁蛋白、次黄嘌呤、胸苷和微量元素的培养基。查中发现，有3种产品的过氧化值超标，过氧化值是评价油脂酸败的指标之一，过氧化值超标会有“哈喇”味；其次，有56种产品菌落总数超过标准规定，菌落总数反映了月饼、月饼馅料被污染程度。其中，淮安市天源酱醋食品厂2006年8月31日生产的淮源牌400克/包苏式月饼（椒盐）菌落总数超过标准规定的66倍多！5种产品大肠菌群超标，盐城市亭湖区城南君香蛋糕西饼屋2006年9月11日生产的广式水果味月饼大肠菌群含量超过标准规定的7倍多。7种产品霉菌含量超标。此外，还有21种产品检出了国家明令禁止使用的苯甲酸，13种产品检出了人工色素柠檬黄、日落黄、亮蓝、胭脂红、苋菜红等。在抽查的所有产品中，有149种产品标签不合格，占不合格总数的50.5%，呈扩大趋势。