生化试剂
公司地址:深圳市宝安区新安街道宝民社区创业二路5号建设银行楼创业二路5-1
企业信息
注册资本:50---100万
注册时间: 2018-04-25
25ml/1590元品牌:美国ZetaLife货号:AD6000500!5ml/2390元品牌:美国ZetaLife货号:AD6000750!75ml/2890元品牌:美国ZetaLife货号:AD6001505ml/4490元品牌:美国ZetaLife货号:AD6005005ml/14580元品牌:美国ZetaLife货号:AD60100010ml/27480元细胞转染简介:随着分子生物学和细胞生物学研究的不断发展,转染已经成为研究和控制真核细胞基因功能的常规工具!
注意事项:质粒DNA必须溶解于无菌双蒸水或超纯水,但不能溶解于提取试剂盒提供的Buffer!溶解于Buffer的质粒转染效率会下降80%左右,甚至会转染失败!质粒必须去除内毒素,内毒素对细胞将产生很大的细胞毒性,会导致转染效率下降70%-80%左右,甚至导致转染失败(推荐使用Qiagen、TIANGEN、Omega去内毒素质粒提取试剂盒)。复合物的制备过程中是绝不能用其他任何试剂对核酸或转染试剂进行稀释,只需将核酸和转染试剂两者按1:1比例直接混合,如果进行了稀释会导致转染失!
ZetaLifeAdvanced系列高效率DNA、RNA转染试剂介绍:目前,一种新型的转染方式可实现高效率转染。美国ZetaLife公司推出ZetaLife转染试剂是全球首创进入细胞后可以被代谢的新型小分子多肽转染试剂,对细胞无毒性,不易出现细胞死亡,不激活细胞免疫机制!ZetaLife转染试剂采用的是新型小分子多肽材料,其特点是非脂质体材料,大小是80nm左右,由于形状是圆形的,不会对细胞有物理性损伤,材料表面有特异性结合接头,只特异性识别DNA、RNA,对血清成分(如细胞因子、蛋白、内毒素等)不识别也不结合;特异性接头与核酸形成转染复合物,转染复合物通过细胞主动吞噬进入细胞,进入细胞后可以被代谢的新型小分子多肽材料,对细胞无内毒素影响,不易出现细胞死亡!
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转染效率高,适用细胞种类多,可转染质粒DNA、siRNA和小动物活体转染!深圳市安培生物科技有限公司是美国ZetaLife公司的中国深圳地区总代理。现货供应ZetaLife转染试剂,均经过反复充分验证,细胞转染效果好且重复性佳!ZetaLife转染试剂产品应用:各种细胞类型中有很高的转染效率;可用于多种真核细胞系的DNA转染、siRNA转染和共转染;可用于各种原代细胞的DNA转染、siRNA转染;可转染极度难转染的免疫细胞、悬浮细胞,如:T细胞、NK细胞、人淋巴细胞、THP-1等;可高效率转染siRNA到任何哺乳动物细胞。
ZetaLife品牌Advanced系列采用新型工业材料,不需要更换培养基;特点是不需要换液,无细胞毒性,转染效率高,适用细胞种类多,可转染质粒DNA、siRNA及小动物活体转染!ZetaLife转染试剂的优势:活体转染ZetaLife公司Advanced系列转染试剂是全球独一个可以做小动物活体转染的转染试剂;脂质体转染试剂进入动物体后会迅速被分解掉,在肺组织内累积,诱发强烈的抗炎反应,具有毒性,因此不能用于小动物活体转染;而ZetaLifeAdvanced系列转染试剂属于新型工业材料,进入小动物皮下,不会被分解掉,能够进入细胞中发挥作用!
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提高转染效率的话,可以适当降低转染时细胞的密度(我试过60~70%的密度比90%更好一些),另外还有可能就是细胞的生长状态,还有在接种后24h内进行转染。转染的效率根本上还是由细胞种类决定的,有些细胞系好转,效率高,有些就不怎么好了。但是我们还是可以尽可能的提高转染效率, 细胞生长状态要好,这个很重要。另外,每种细胞系都有自己的好用的转染试剂,要多看文献知道这种细胞系用哪种转染试剂*多。
然后自己可以按照DNA和转染试剂的比例做个曲线,看看reporter的表达效率,做到好的转染效率。其实DNA的质量也很重要,不仅仅是内毒素影响细胞的生存,一般情况下DNA超螺旋好比列越高越好。为了促进表达,转染前线性化也可以(可能是这样,没有这么做过)。如果有些细胞系确实难转,就应该考虑其他方法了,电穿,病毒之类的。amaxa的nucleofector可以直接把质粒打到核里,很好用。不客气,努力!。
生化试剂
公司地址:深圳市宝安区新安街道宝民社区创业二路5号建设银行楼创业二路5-1
企业信息
注册资本:50---100万
注册时间: 2018-04-25