核酸复合物制备：将核酸与转染试剂按照1:1关系直接混合，用移液器吹吸10-15次混匀，室温静止10-15分钟.在细胞培养基中加入核酸复合物：根据参考用量在细胞中加入核酸复合物，并轻轻混匀；细胞培养基里面可以含有血清!细胞换液：转染24小时后对细胞进行正常换液，悬浮细胞转染过程中不用换液.分析结果：质粒DNA转染48-72小时后荧光检测转染效率，48-96小时检测mRNA或蛋白表达。若进行稳定表达细胞株的筛选，则在转染后24-48小时左右加入适量的药物进行筛选。

　　产品说明：产品名称AdvancedDNARNATransfectionReagent储存条件常温运输，4℃保存，可保存两年，拒绝反复冻融!包装规格货号：AD60002AD600050、AD60007AD600150、AD600500、AD601000规格：0！25ml、0。5ml、0。75ml、5ml、5ml、10ml使用说明：材料准备RNA浓度20uM/L质粒DNA浓度300ng-2ug/ul（注意：①溶解于无菌双蒸水或超纯水；②无内毒素）操作步骤提前1天接种细胞：细胞汇合度在60-80%左右，再进行转染!

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江苏巨噬细胞转染试剂的作用

　　siRNA转染后9小时荧光检测转染效率，48-72小时检测mRNA或蛋白表达！转染操作示意图不同转染实验各成分推荐用量各品牌转染试剂类型与ZetaLife转染试剂的差异比较：Thermo品牌Lipo2000采用阳离子脂质体，需要更换培养基；特点是毒性大；转染前后需要更换培养基；可以转染质粒DNA、siRNA（效果差）!Thermo品牌Lipo3000采用阳离子脂质体，需要更换培养基；特点是相比Lip2000毒性略小；转染前后需要更换培养基；可以转染质粒DNA、siRNA（效果较差）.

　　在研究基因功能、调控基因表达、突变分析和蛋白质生产等生物学试验中，其应用越来越广泛!转染，是将外源性基因导入细胞内的一种专门技术。随着基因与蛋白功能研究的深入，转染目前已成为实验室工作中经常涉及的基本方法.转染大致可分为物理介导、化学介导和生物介导三类途径.电穿孔法、显微注射和基因枪属于通过物理方法将基因导入细胞的范例;化学介导方法很多，如经典的磷酸钙共沉淀法、脂质体转染方法、和多种阳离子物质介导的技术;生物介导方法，有较为原始的原生质体转染，和现在比较多见的各种病毒介导的转染技术！

　　注意事项：质粒DNA必须溶解于无菌双蒸水或超纯水，但不能溶解于提取试剂盒提供的Buffer。溶解于Buffer的质粒转染效率会下降80%左右，甚至会转染失败.质粒必须去除内毒素，内毒素对细胞将产生很大的细胞毒性，会导致转染效率下降70%-80%左右，甚至导致转染失败（推荐使用Qiagen、TIANGEN、Omega去内毒素质粒提取试剂盒）.复合物的制备过程中是绝不能用其他任何试剂对核酸或转染试剂进行稀释，只需将核酸和转染试剂两者按1:1比例直接混合，如果进行了稀释会导致转染失。

　　理想细胞转染方法，应该具有转染效率高、细胞毒性小等优点！病毒介导的转染技术，是目前转染效率较高的方法，同时具有细胞毒性很低的优势!但是，病毒转染方法的准备程序复杂，常常对细胞类型有很强的选择性，在一般实验室中很难普及。其它物理和化学介导的转染方法，则各有其特点！无论采用哪种转染技术，要获得较优的转染结果，可能都需要对转染条件进行优化！影响转染效率的因素很多，从细胞类型、细胞培养条件和细胞生长状态，到转染方法的操作细节，都需要考虑！

　　ZetaLife转染试剂可转染极度难转染的免疫细胞、悬浮细胞，如:T细胞、NK细胞、人淋巴细胞、THP-1等；可高效率转染siRNA到任何哺乳动物细胞;用于将DNA和siRNA转染到真核细胞系和各种原代细胞中.ZetaLife转染试剂突出表现：ZetaLife多肽小分子转染试剂的尺寸大小是传统脂质体转染试剂体积的1/10;本转染试剂是通过细胞内㖔和细胞主动吸收进入细胞；本转染试剂进入后对细胞膜无物理性损伤，不易出现细胞变形，保持高的细胞活力；不激活细胞表面或细胞体内marker;可反映真实的细胞通路蛋白原始数据；可转染免疫细胞、悬浮细胞等.