溶解于Buffer的质粒转染效率会下降80%左右，甚至会转染失败。质粒必须去除内毒素，内毒素对细胞将产生很大的细胞毒性，会导致转染效率下降70%-80%左右，甚至导致转染失败（推荐使用Qiagen、TIANGEN、Omega去内毒素质粒提取试剂盒）。复合物的制备过程中是绝不能用其他任何试剂对核酸或转染试剂进行稀释，只需将核酸和转染试剂两者按1:1比例直接混合，如果进行了稀释会导致转染失。转染试剂与核酸混匀后用移液器吹打10-15次，室温孵育10-15分钟后即可加入细胞培养板.

　　理想细胞转染方法，应该具有转染效率高、细胞毒性小等优点.病毒介导的转染技术，是目前转染效率较高的方法，同时具有细胞毒性很低的优势。但是，病毒转染方法的准备程序复杂，常常对细胞类型有很强的选择性，在一般实验室中很难普及.其它物理和化学介导的转染方法，则各有其特点。需要指出的一点，无论采用哪种转染技术，要获得较优的转染结果，可能都需要对转染条件进行优化!影响转染效率的因素很多，从细胞类型、细胞培养条件和细胞生长状态，到转染方法的操作细节，都需要考虑!

　　细胞换液：转染24小时后对细胞进行正常换液，悬浮细胞转染过程中不用换液.分析结果：质粒DNA转染48-72小时后荧光检测转染效率，48-96小时检测mRNA或蛋白表达.若进行稳定表达细胞株的筛选，则在转染后24-48小时左右加入适量的药物进行筛选.siRNA转染后9小时荧光检测转染效率，48-72小时检测mRNA或蛋白表达!注意事项：质粒DNA必须溶解于无菌双蒸水或超纯水，但不能溶解于提取试剂盒提供的Buffer。

　　细胞转染简介：随着分子生物学和细胞生物学研究的不断发展，转染已经成为研究和控制真核细胞基因功能的常规工具。在研究基因功能、调控基因表达、突变分析和蛋白质生产等生物学试验中，其应用越来越广泛.转染，是将外源性基因导入细胞内的一种专门技术!随着基因与蛋白功能研究的深入，转染目前已成为实验室工作中经常涉及的基本方法！转染大致可分为物理介导、化学介导和生物介导三类途径.电穿孔法、显微注射和基因枪属于通过物理方法将基因导入细胞的范例;化学介导方法很多，如经典的磷酸钙共沉淀法、脂质体转染方法、和多种阳离子物质介导的技术;生物介导方法，有较为原始的原生质体转染，和现在比较多见的各种病毒介导的转染技术.

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