生化试剂
公司地址:深圳市宝安区新安街道宝民社区创业二路5号建设银行楼创业二路5-1
企业信息
注册资本:50---100万
注册时间: 2018-04-25
ZetaLifeAdvanced系列高效率DNA、RNA转染试剂介绍:我司代理ZetaLife转染试剂全球首创进入细胞后可以被代谢的新型小分子多肽转染试剂,对细胞无毒性,不易出现细胞死亡,不激活细胞免疫机制.ZetaLife转染试剂采用的是新型小分子多肽材料,其特点是非脂质体材料,大小是80nm左右,由于形状是圆形的,不会对细胞有物理性损伤,材料表面有特异性结合接头,只特异性识别DNA、RNA,对血清成分(如细胞因子、蛋白、内毒素等)不识别也不结合;特异性接头与核酸形成转染复合物,转染复合物通过细胞主动吞噬进入细胞,进入细胞后可以被代谢的新型小分子多肽材料,对细胞无内毒素影响,不易出现细胞死亡!
细胞换液:转染24小时后对细胞进行正常换液,悬浮细胞转染过程中不用换液.分析结果:质粒DNA转染48-72小时后荧光检测转染效率,48-96小时检测mRNA或蛋白表达!若进行稳定表达细胞株的筛选,则在转染后24-48小时左右加入适量的药物进行筛选!siRNA转染后9小时荧光检测转染效率,48-72小时检测mRNA或蛋白表达。注意事项:质粒DNA必须溶解于无菌双蒸水或超纯水,但不能溶解于提取试剂盒提供的Buffer!
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溶解于Buffer的质粒转染效率会下降80%左右,甚至会转染失败.质粒必须去除内毒素,内毒素对细胞将产生很大的细胞毒性,会导致转染效率下降70%-80%左右,甚至导致转染失败(推荐使用Qiagen、TIANGEN、Omega去内毒素质粒提取试剂盒)!复合物的制备过程中是绝不能用其他任何试剂对核酸或转染试剂进行稀释,只需将核酸和转染试剂两者按1:1比例直接混合,如果进行了稀释会导致转染失!转染试剂与核酸混匀后用移液器吹打10-15次,室温孵育10-15分钟后即可加入细胞培养板.
转染24小时后进行正常换液,不能像Lipo2000一样转染4-6小时后换液!原代细胞、免疫细胞转染时,细胞基础培养基里面不能含有双抗培养基!转染操作示意图不同转染实验各成分推荐用量ZetaLifeAdvancedDNARNA转染试剂系列价格:品牌:美国ZetaLife货号:AD6000250.25ml/1590元品牌:美国ZetaLife货号:AD6000500!5ml/2390元品牌:美国ZetaLife货号:AD6000750。
深圳市安培生物科技有限公司在生化试剂这个行业中,是一家屈指可数的好公司。其主营的产品——原代细胞转染试剂,更是在业界中受到广大客户的喜爱。
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深圳市安培生物科技有限公司安培生物科技,我们巍峨耸立于深圳市宝安区新安街道宝民社区创业二路5号建设银行楼创业二路5-1,我们在这里等待您的到来。 也可以通过电话联系: 联系方式:19126518388 联系人:华伟 致电我们,有意向不到的惊喜!
75ml/2890元品牌:美国ZetaLife货号:AD6001505ml/4490元品牌:美国ZetaLife货号:AD6005005ml/14580元品牌:美国ZetaLife货号:AD60100010ml/27480元产品详情:ZetaLife公司与美国加利福尼亚大学旧金山校区联合开发用于哺乳动物细胞、活体动物转染的AdvancedDNARNA第三代多肽小分子转染试剂,此技术成为新的全球蛋白功能、免疫细胞及干细胞治疗、研发及生产的主要关键技术之一。
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提高转染效率的话,可以适当降低转染时细胞的密度(我试过60~70%的密度比90%更好一些),另外还有可能就是细胞的生长状态,还有在接种后24h内进行转染。转染的效率根本上还是由细胞种类决定的,有些细胞系好转,效率高,有些就不怎么好了。但是我们还是可以尽可能的提高转染效率, 细胞生长状态要好,这个很重要。另外,每种细胞系都有自己的好用的转染试剂,要多看文献知道这种细胞系用哪种转染试剂*多。
然后自己可以按照DNA和转染试剂的比例做个曲线,看看reporter的表达效率,做到好的转染效率。其实DNA的质量也很重要,不仅仅是内毒素影响细胞的生存,一般情况下DNA超螺旋好比列越高越好。为了促进表达,转染前线性化也可以(可能是这样,没有这么做过)。如果有些细胞系确实难转,就应该考虑其他方法了,电穿,病毒之类的。amaxa的nucleofector可以直接把质粒打到核里,很好用。不客气,努力!。
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